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小鼠誘導型多能干細胞（iPS細胞）OSKM-1（干細胞庫保藏）說明書冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　小鼠誘導型多能干細胞（iPS細胞）OSKM-1（干細胞庫保藏）說明書
種屬:OSKM-1

類型:小鼠胚胎成纖維細胞

形態(tài):球形*

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:小鼠iPS完全培養(yǎng)液（600ml）： DMEM (Invitrogen 12430) 485 ml ES級FBS (biochrom S4115) 90 ml Glutamax (Invitrogen 35050) 6 ml NEAA (Invitrogen 11140) 6 ml Nucleosides (Millipore ES-008-D) 6 ml LIF (Millipore ESG1107) 60 μl（終濃度為1000U/ml） β-Mer (Invitrogen 21985) 1.5 ml PS (Millipore TMS-AB2-C) 6 ml 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。
細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是小鼠誘導型多能干細胞（iPS細胞）OSKM-1（干細胞庫保藏）說明書的相關熱銷產(chǎn)品：
銦標準溶液（1000μg/ml,基體：1.0 mol/L 硝酸）Indium standard質量規(guī)格：1000μg/ml,基體：1.0 mol/L 硝酸  小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒 ，英文名： PDGF-AB ELISA Kit  ELISAKitTGFβ2小鼠轉化生長因子β2規(guī)格：48T/96T

銦標準溶液（100mg/L(20℃)，基體：1％HCl）Indium standard質量規(guī)格：100mg/L(20℃)，基體：1％HCl  小鼠膀胱抗原(BTA)ELISA檢測試劑盒MouseBladdeumoraigen,BTAELISAKit 96T/48T  Humancoicoopin-releasingfactor，CRF人促腎上腺皮質激素釋放因子(CRF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三環(huán)唑標準溶液(10μg/ml,u=2%)Tricyclazol solution質量規(guī)格：10μg/ml,u=2%  人激動異構酶/細胞分裂素MB(CKMB)試劑盒 Human cytokinin MB,CKMB ELISA Kit  人傷寒抗原(St-Ag)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

氟樂靈標準溶液(100μg/ml,u=3%)Trifluralin solution質量規(guī)格：100μg/ml,u=3%  RatCalfIestineAlkalinePhosphatase,CIAPELISAKit大鼠牛小腸堿性1酸酶(CIAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  小鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)試劑盒 Mouse acetylcholine receptor aibody,AChRab ELISA Kit
MouseActivinA,ACV-AELISA試劑盒小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  83-49-8豬去氧膽酸    Hyodeoxycholic acid

小鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC1 ELISA Kit  89412-79-3竹節(jié)香附素A說明書  Raddeanin A

小鼠內(ET)ELISA檢測試劑盒Mouseendotoxin,ETELISAKit 96T/48T  517-88-4紫草素品牌  shikonin

人相關抗原7(SPAG7)試劑盒 Human sperm associated aigen 7,SPAG7 ELISA Kit  28831-65-4紫草酸規(guī)格  Lithospermic acid

RatAndrostenedione,ASDELISAKit大鼠雄烯二同(ASD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  118-34-3紫丁香苷   Syringin
219944-46-4七葉皂苷D品牌  AescinIIB   英文名稱RatProlactinELISAKit大鼠促乳素(Prolactin)規(guī)格：96T/48T

21967-41-9黃芩苷品牌  Baicalin   英文名稱RatProinsulinELISAKit大鼠原(PI)規(guī)格：96T/48T

21967-41-9黃芩苷品牌  Baicalin  英文名稱RatProinsulinELISAKit大鼠原(PI)規(guī)格：96T/48T

2188-68-3鹽酸石蒜堿規(guī)格  Lycorine chloride  英文名稱RatProgesteroneELISAkit大鼠孕激素(Progesterone)ELISAkit規(guī)格：96T/48T

2182-14-1文多靈品牌   Vindoline  英文名稱RatProgesteroneELISAkit大鼠孕激素(Progesterone)ELISAkit規(guī)格：96T/48T
小鼠誘導型多能干細胞（iPS細胞）OSKM-1（干細胞庫保藏）說明書小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒 ，英文名： NE ELISA Kit  508-02-1齊墩果酸規(guī)格  Oleanolic acid

小鼠二(MDA)ELISA檢測試劑盒Mousemalondialchehyche,MDAELISAKit 96T/48T  52659-56-0奇任醇   Kirenol

人軍團菌抗體IgG(LP Ab-IgG)試劑盒 Human Legionella aibody IgG,LP Ab-IgG ELISA Kit  千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷說明書   Oroxylin A 7-O-glucuronide

RatactivatedproteinC,APCELISAKit大鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  480-11-5千層紙素A品牌   Oroxylin A

載玻片細胞RyR受體蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20  481-49-2千金藤素規(guī)格  Cepharanthine
收到小鼠誘導型多能干細胞（iPS細胞）OSKM-1（干細胞庫保藏）說明書處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。