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人神經(jīng)干細胞 冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　人神經(jīng)干細胞
種屬:HNSC

類型:貼壁

安全等級:1

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:H-DMEM，90%；FBS，10%；雙抗

生長條件:Temperature: 37.0°C Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

存儲條件:Freeze medium: FBS/NBS, 92%; DMSO, 8%（for reference） Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase
細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是人神經(jīng)干細胞 的相關熱銷產(chǎn)品：
熒光素-5-馬來Fluorescein-5-maleimide質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97.0%,進口  ELISAKitCDK-4人周期素依賴性激酶4規(guī)格：48T/96T  心肌錨蛋白重復域1(ANKRD1)ELISA試劑盒 ，英文名： ANKRD1 ELISA Kit

Veliparib (ABT-888)Veliparib (ABT888)質(zhì)量規(guī)格：>98%  小鼠/離子轉運ATP酶β1肽(ATP1β1)ELISA試劑盒 ，英文名： ATP1β1 ELISA Kit  Mouseinsulinaoaibodies,IAAELISA試劑盒小鼠自身抗體(IAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

萘夫西林鈉Nafcillin  salt monohydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  人谷胱甘肽S轉移酶(GSTs)ELISA檢測試劑盒HumanglathioneS-ansferases,GSTsELISAKit 96T/48T  ELISAKitET-1兔子內(nèi)皮素1規(guī)格：48T/96T

苯佐卡因-d4Benzocaine-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進口  大鼠自身抗體(IAA)試劑盒 Rat insulin aoaibodies,IAA ELISA Kit  ChickenImmunoglobulinG,IgGELISAKit雞球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠整合素α-IIb(Itga2b/CD41)ELISA試劑盒 ，英文名： Itga2b/CD41 ELISA Kit  24697-74-3鹽酸益母草堿說明書  Leonurine

小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA檢測試劑盒Mouseglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit 96T/48T  65-19-0鹽酸育亨賓品牌   Yohimbine

人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒 Human MDC ELISA kit  17912-87-7楊梅苷規(guī)格   Myricetrin

Ratalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  529-44-2楊梅素   Myricetin

載玻片細胞β脘蛋白(PRION)蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20  1362-42-1洋艾素說明書  Absinthiin
298-81-7花椒說明書  8-Methoxypsoralen   英文名稱RvatPhospholipidaseA2elisakit大鼠1脂酶A2(sPLA2)規(guī)格：96T/48T

298-81-7花椒   8-Methoxypsoralen   英文名稱RvatPhospholipidaseA2elisakit大鼠1脂酶A2(sPLA2)規(guī)格：96T/48T

29838-67-3落新婦苷   Astilbin  英文名稱Ratβ-ThromboglobulinELISAKit大鼠β血小板球蛋白(β-TG)規(guī)格：96T/48T

29782-68-1水飛薊寧說明書  Silydianin    英文名稱Ratβ-ThromboglobulinELISAKit大鼠β血小板球蛋白(β-TG)規(guī)格：96T/48T

29782-68-1水飛薊寧說明書  Silydianin   英文名稱Ratβ-HCGELISAKit大鼠絨毛膜激素β(β-HCG)規(guī)格：96T/48T
人神經(jīng)干細胞 小鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒 ，英文名： F-TESTO ELISA Kit  140147-77-9朝藿定A1規(guī)格  Epimedin A1

小鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)ELISA檢測試劑盒MouseClaracellprotein,CC16ELISAKit 96T/48T  二氫姜黃素   Dihydrocurcumin

人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CF)試劑盒 Human CF ELISA Kit  2385-63-9蓮心堿高氯酸鹽說明書  Liensinine Perchlorate

Ratai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISAKit大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  122021-74-3丹參酚酸B甲酯品牌  Monomethyl lithospermate B

組蛋白H2B-K5乙?；瘷z測試劑盒10/20等  88182-33-6歐當歸內(nèi)酯A規(guī)格  Levistilide A
收到人神經(jīng)干細胞 處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。