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細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。

資源名稱　人轉(zhuǎn)基因細(xì)胞
種屬:RKO-E6

類型:，轉(zhuǎn)染插入到pCMV中的HPV E6

形態(tài):上皮細(xì)胞

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:MEM培養(yǎng)基(GIBCO,貨號41500034，添加NaHCO3 1.5g/L，Sodium Pyruvate 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。

生長特性:貼壁生長

人轉(zhuǎn)基因細(xì)胞形態(tài)來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線

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草毒死（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 Allidochlor  SYBR綠染法組織端粒酶活性AP電泳分析試劑盒10  人血血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)試劑盒 Human Platelet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISA kit

Amberlite® IRP-69陽離子交換樹脂質(zhì)量規(guī)格： Amberlite® IRP-69  rabbitInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2ELISA試劑盒兔子胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人抗麥膠蛋白/麥醇溶蛋白抗體(AGA)ELISA試劑盒 ，英文名： AGA ELISA Kit

氨苯蝶啶（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定Triamterene  小鼠表皮生長因子(EGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  RathighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISA試劑盒大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA檢測試劑盒MouseEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 96T/48T  63902-38-5松酯醇二葡萄糖苷品牌  Pinoresinol diglucoside

人聚集蛋白(Agrin)試劑盒 Human Agrin ELISA Kit  113146-74-0酸漿苦味素L規(guī)格  Physalin L

Ratadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISAKit大鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  55466-04-1酸棗仁皂苷A   Jujuboside A

載玻片細(xì)胞TSH-BETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20  55466-05-2酸棗仁皂苷B說明書  Jujuboside B

Mouse25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISA試劑盒小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  194851-84-8酸棗仁皂苷D品牌  Jujuboside D
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38763-29-0甲基黃連堿   Worenine   載玻片細(xì)胞PDGF-A蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

38748-32-2雷公藤甲素說明書  Triptolide  載玻片細(xì)胞PDGF-A蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20

38647-11-9CAS號：38647-11-9   Triptonide   載玻片細(xì)胞PARP蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20

38642-49-8苯甲酰芍藥苷規(guī)格  benzoylpaeoniflorin   載玻片細(xì)胞PAR-3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20
人轉(zhuǎn)基因細(xì)胞形態(tài)兔子孕激素/孕酮(PROG)ELISA檢測試劑盒RabbitProgesterone,PROGELISAKit 96T/48T  545-47-1羽扇豆醇品牌  Lupeol

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英文名稱HumanPro-ANP(1-98)ELISAKit人心肽Pro-ANP(1-98)規(guī)格：96T/48T  6807-83-6三葉豆紫檀苷   Trifolirhizin

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培養(yǎng)操作步驟：
人轉(zhuǎn)基因細(xì)胞形態(tài)產(chǎn)品僅用于科研1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。