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細(xì)胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞（彝族）形態(tài)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞（彝族）形態(tài)
種屬:KM934

形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:RPMI1640(w/oHepes)15%NBS

生長特性:懸浮生長

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞（彝族）形態(tài)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。
以下是EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞（彝族）形態(tài)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 46)Vacuum pump oil質(zhì)量規(guī)格：Viscosity Grade 46  人甲狀腺素抗體試劑盒 Human Thyroxine aibody ELISA Kit  人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 68)Vacuum pump oil質(zhì)量規(guī)格：Viscosity Grade 68  RatAquaporin5,AQP-5ELISAKit大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)試劑盒 Mouse histon-H2b ELISA Kit

腺苷3',5'-環(huán)單1酸鹽，N6-苯甲酰-鈉鹽Adenosine 3′,5′-cyclic Monophosphate, N6-Benzoyl-,  Salt  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口  組蛋白H4-K12乙?；瘷z測試劑盒10/20等  豬圓環(huán)病毒通用型(PCV-U)核酸檢測試劑盒 48T

腺苷 2':3'-環(huán)單1酸鹽鈉鹽Adenosine 2':3'-cyclic monophosphate  salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口  MouseAi-ypsin,ATELISA試劑盒小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  HumanPhosphoglucomase,PGMELISA試劑盒人1酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Ratadrenomedullin,ADMELISAKit大鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  82508-31-4土槿皮乙酸品牌  Pseudolaric Acid B

載玻片細(xì)胞TUBULIN蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20  546-43-0土木香內(nèi)酯規(guī)格  Alantolactone

Mouse50%complemehemolysis,CH50ELISA試劑盒小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  5289-74-7蛻皮激素   Ecdysterone

小鼠脂多糖(LPS)ELISA試劑盒 ，英文名： LPS ELISA Kit  73-31-4褪黑素說明書  Melatonin

相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)ELISA檢測試劑盒Monkeytumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3ELISAKit 96T/48T  30045-16-0脫氫紫堇堿品牌  Dehydrocorydaline
3681-93-4牡荊素規(guī)格  Vitexin   載玻片細(xì)胞MYC蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20

366814-42-8苦蘇花皂苷C規(guī)格  Cussosaponin C   載玻片細(xì)胞MAPK蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20

3650--09-7鼠尾草酸規(guī)格  Carnosic acid  載玻片細(xì)胞JNK/SAPK蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20

364779-15-7人參皂苷Rk3說明書  Ginsenoside Rk3  載玻片細(xì)胞IP3R受體蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20

36284-77-2常春藤皂苷B品牌  Hederasaponin B   載玻片細(xì)胞INSULIN蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞（彝族）形態(tài)小鼠雌二醇受體(ER)ELISA檢測試劑盒MouseEsadiolreceptor,ERELISAKit 96T/48T  97682-44-5伊立替康   Irinotecan

人金屬硫蛋白2(MT-2)試劑盒 Human MT-2 ELISA Kit  86639-52-37-乙基-10羥基喜樹堿說明書  7-Ethyl-10-hydroxycamptothecin

RatangiotensionⅠ,Ang-ⅠELISAKit大鼠緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  12542-36-8醋酸棉酚品牌  Acetate gossypol

總抗氧化能力(TAC)終點比色法定量檢測試劑盒50  303-45-7棉酚規(guī)格  Gossypol

Mousealpha-fetoproteinLensculinarisaggliin3,AFP-L3ELISA試劑盒小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  總大豆皂苷B