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社鼠肺成纖維樣細(xì)胞形態(tài)冷凍保存細(xì)胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟：

資源名稱(chēng)　社鼠肺成纖維樣細(xì)胞形態(tài)
種屬:CWBRL2

形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞分類(lèi)：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是社鼠肺成纖維樣細(xì)胞形態(tài)的相關(guān)熱銷(xiāo)產(chǎn)品：
原薯蕷皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Protodioscin  人酸脫氫酶E1(PDHE1)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanpyruvatedehydrogenase-E1,PDHE1ELISAKit 96T/48T  人體BRCA-1基因甲基化檢測(cè)試劑盒20

原蘇木素B/原巴西蘇木素（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Protosappanin B  大鼠解整合素樣金屬蛋白酶19(ADAM19)試劑盒 Rat A Disiegrin And Metalloprotease 19,ADAM19 ELISA Kit  ELISAKitai-CMVIgM人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgM規(guī)格：48T/96T

遠(yuǎn)志酸（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Polygalacic acid  英文名稱(chēng)Ratα1-AcidglycoproteinELISAKit大鼠α1-酸性糖蛋白(α1-AGP)規(guī)格：96T/48T  大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒 ，英文名： apo-B100 ELISA Kit

遠(yuǎn)志皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Senegenin  咖啡環(huán)氨酸(cyclamate)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20  人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanHeatShockProtein60,HSP-60ELISAKit 96T/48T
Ratheatshockprotein90,hSP-90ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  491-70-3木犀草素品牌  Luteolin

小鼠α誘導(dǎo)蛋白6(TNFαIP6)ELISA試劑盒 ，英文名： TNFαIP6 ELISA Kit  553-21-9木香烴內(nèi)酯規(guī)格  Costundide

犬肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit 96T/48T  13133-07-8耐斯糖   Nystose

犬(EPI)試劑盒 Canine Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit  26116-89-2鬧羊花II說(shuō)明書(shū)  Rhodojaponin-II

英文名稱(chēng)HumanapoA1ELISAKit人載脂蛋白A1(apoA1)規(guī)格：96T/48T  26116-89-2鬧羊花II品牌  Rhodojaponin-II
5041-81-6異甘草苷說(shuō)明書(shū)  Isoliquiritoside  植物葉綠體外膜功能檢測(cè)試劑盒20

50298-90-3雪膽素乙說(shuō)明書(shū)  Cucurbitacin Ⅱb   植物葉綠體F型ATP酶(FtypeATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20

50298-90-3雪膽素乙   Curcubitacin IIb   植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒50

502-65-8番茄紅素說(shuō)明書(shū)  lycopene   植物細(xì)胞周期G0期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10

501-98-4對(duì)香豆酸規(guī)格  p-Coumaric acid   植物細(xì)胞色素C氧化酶活性測(cè)定試劑盒20
社鼠肺成纖維樣細(xì)胞形態(tài)犬緊張素1-7(Ang1-7)試劑盒 Dog angiotension 1-7,Ang1-7 ELISA kit  502-65-8番茄紅素說(shuō)明書(shū)  lycopene

英文名稱(chēng)HumaissuefactorpathwayinhibitorELISAKit人組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  81-27-6番瀉苷A品牌  Sennoside A

超敏型ECL印跡化學(xué)發(fā)光溶液A液：100毫升B液：500微升1000cm2  128-57-4番瀉苷B規(guī)格  Sennoside B

Ratglucocoicoidreceptor-β,GR-βELISA試劑盒大鼠糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  37271-16-2番瀉苷C   Sennoside C

小鼠轉(zhuǎn)錄激活因子6(ATF6)ELISA試劑盒 ，英文名： ATF6 ELISA Kit  37271-17-3番瀉苷D說(shuō)明書(shū)  Sennoside D
收到社鼠肺成纖維樣細(xì)胞形態(tài)處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。