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細(xì)胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
恒河猴胚腎細(xì)胞培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　恒河猴胚腎細(xì)胞培養(yǎng)
種屬:FRhK-4

類型:正常腎

形態(tài):上皮細(xì)胞

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:DMEM培養(yǎng)基(GIBCO,添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到恒河猴胚腎細(xì)胞培養(yǎng)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
以下是恒河猴胚腎細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
組胺(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BCHistamine  人脫氧尿三1酸(DP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humandeoxyuridineiphate,DPELISAKit 96T/48T  Humanai-livercellmembraneaibody,LMAELISA試劑盒人抗抗體(LMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

胰酶(1:4500)質(zhì)量規(guī)格：酶活1:4500,BRPancreatin  大鼠同型半胱氨酸(Hcy)試劑盒 Rat Homocysteic acid,Hcy ELISA Kit  Humancarcinoembryonicaign,CEAELISAKit人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

枸櫞酸奧芬那君;枸酸芬那君質(zhì)量規(guī)格：>98%,BROrphenadrine   英文名稱RatcarbonicanhydraseELISAKit大鼠酶(CA)規(guī)格：96T/48T  人Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

β-半乳糖苷酶質(zhì)量規(guī)格：700u/mg，羅氏分裝β-Galactosidase  化妝品阿斯巴塘(aspaame)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20  兔乙酰膽堿酯酶(AChE)試劑盒 Rabbit Acetylcholinesterase,ACHE ELISA kit
人抗補(bǔ)體1q抗體(ai-C1q-aibody)試劑盒 Human ai-C1q-aibody ELISA Kit  3,5,6,7,8,3’,4’-七甲氧基黃酮規(guī)格  3,5,6,7,8,3’,4’-heptemthoxyflavone

RabbitTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit兔組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  873001-54-83,29-二苯甲?；闃侨嗜?   3,29-Dibenzoyl Rarounitriol

載玻片細(xì)胞CREB蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20  3，6-二芥子?；崽钦f明書  3,6’－Disinapoyl sucrose

Humanβai-galactanproteinsIgGELISA試劑盒人β乳糖蛋白抗體IgGELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  117047-07-13’-甲氧基葛根素品牌  3’-MethoxyPuerarin

小鼠組織蛋白去乙?；?/span>(HD)ELISA試劑盒 ，英文名： HD ELISA Kit  3-羥基巴戟醌規(guī)格  3-Hydroxy-　morindone
R型三七皂苷R2   （R）Notoginsenoside R2   組織離子(Na)濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒20

989-51-5表沒食子兒茶素沒食子酸酯規(guī)格  EGCG   組織離子(Na)濃度化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20

98665-22-6靈芝酸G品牌  Ganoderic acid G    組織科薩基病毒B(CoxsackievirusB)定性檢測(cè)試劑盒20

98474-78-3擬人參皂苷RT5說明書  Pseudoginsenoside RT5  組織巨噬細(xì)胞型抗酸酸性1酸酶(SACP)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20

98296-48-1靈芝酸C2規(guī)格  Ganoderic acid C2    組織精氨酸(arginine)含量化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20
恒河猴胚腎細(xì)胞培養(yǎng)RabbitVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  28649-60-7環(huán)氧續(xù)隨子醇品牌  Epoxylathyrol 

載玻片細(xì)胞IGF蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20  6873-13-8黃柏堿規(guī)格  Phellodendrine

Humanβ-siteAPP-CleavingEnzyme1，1BACE1ELISA試劑盒人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  751-03-1黃柏酮   Obacunone

小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 ，英文名： TGF-β1 ELISA Kit  40246-10-4黃豆黃苷說明書  Glycitin

小鼠糖原1酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit 96T/48T  40957-83-3黃豆黃素品牌  Glycitein