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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 90%FBS+10%DMSO 液氮 |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX4276 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細(xì)胞形態(tài) | 淋巴母細(xì)胞 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 懸浮生長 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
人惡性非霍奇金患者的自然殺傷細(xì)胞 冷凍保存細(xì)胞之方法:
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟:
資源名稱 人惡性非霍奇金患者的自然殺傷細(xì)胞
種屬:NK-92MI
類型:懸浮生長
形態(tài):淋巴母細(xì)胞
分離基物NK細(xì)胞;;男性
提供形式:T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶/凍存管
模式菌株:未知
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%FBS
生長條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度
存儲條件:90%FBS+10%DMSO 液氮
細(xì)胞分類:
第一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過程:
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是人惡性非霍奇金患者的自然殺傷細(xì)胞 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
CEM/C1(人急性細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸D-甘露糖,英文名或英文縮寫:D-Mannosamine HC1,級別:高,98%,規(guī)格:25毫克
HUtSMC Pellet 人細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人表皮角質(zhì)細(xì)胞-cDNAHEK-acDNA鱗醋硼,水合 BORON PHOSPHcTq 13308-21-2
CL-0098HCT-8(人盲腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×23-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二本基溴化四氮唑噻唑藍(lán),英文名或英文縮寫:MTT,級別:超,99%,規(guī)格:500克
RSPO1 Others Human 人 R-Spondin 1 / RSPO1 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二氧化鋯,英文名或英文縮寫:Zirconium dioxide,級別:5N,規(guī)格:25克
人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞裂解物HA-c LNeomycinSulfate 5g/25g/100g INALCO原裝
615小鼠株;Ca759二甲磺酸阿米三嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Almitrine Bismesylate
OSTM1 Others Human 人 OSTM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 蘿巴新(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Raubasine
AsoFectagen?星形細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒卡莫氟(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法含量測定用Carmofur
FGFR4 Others Human 人 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 尼可占替諾(煙酸占替諾)標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法含量測定用Xanthinol nicotinate
CatL2 家貓肺成纖維樣細(xì)胞鹽酸黃酮哌酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Flavoxate
大鼠神經(jīng)皮質(zhì)細(xì)胞(RNc)(1×106) SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人*癌細(xì)胞 Human醌-2-磺酸鈉shēng huà shì jì容量:RT1毫克
人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞;HES粘液酸 Mucic acid,98% 526-99-8 25G 通用試劑
SCN2B Others Human 人 SCN2B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 羌炳基-β-環(huán)糊精 xy7noxypropyl Bqtcdqx 18446-32-2
C57BL/6小鼠胚胎干細(xì)胞 C57BL/6 mouse embryonic stem cells超氧化物歧化酶(抽取法)測試盒50塊/箱
RPMI-8226細(xì)胞,人細(xì)胞 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌 SV40T轉(zhuǎn)化人臍內(nèi)皮細(xì)胞;PUMC-HUVEC-T11866-15-5化乙酰硫代膽堿(+4℃)ACETYLTHIOCHOLINE IODIDE
人惡性非霍奇金患者的自然殺傷細(xì)胞 人口腔角質(zhì)細(xì)胞裂解物HOKL蛋白酶1底物2m,熒光Caspase 1 Substrate 2m (ICE),fluorogenic; Ac-YVAD-AMC質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
IGFBP6 Others Human 人 IGFBP6 / IBP-6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 蛋白酶3底物1m,熒光Caspase 3 Substrate 1m(Apopain), fluorogenic; Ac-DEVD-AMC質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
BRL-3A 大鼠正常肝細(xì)胞抗菌肽B;天蠶絲抗菌肽Cecropin B質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
CL-0118HT-29(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2卡律蝎Charybdotoxin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞促皮質(zhì)素釋放因子,綿羊Corticotropin Releasing Factor,ovine質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
收到人惡性非霍奇金患者的自然殺傷細(xì)胞 處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。