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大額牛腎細(xì)胞形態(tài)冷凍保存細(xì)胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟：

資源名稱　大額牛腎細(xì)胞形態(tài)
種屬:BFR-K1

形態(tài):上皮樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:M-199:withEarle＇sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

生長特性:貼壁生長
細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過程：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是大額牛腎細(xì)胞形態(tài)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
HBSMC Pellet 人平滑肌細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪裂解物HMSC-ad LEDDAB十二烷基乙基化25毫克BS

CL-0130K-562(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2溴全縮二醇(含穩(wěn)定劑碳醋鉀) Bromoccqtcldqhydq dimqthyl ccqtcl 72-83-7

ADAM15 Others Human 人 ADAM15 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 曙紅 Y (二鈉鹽) Eosin Y di salt (Dye content, ≥... 17372-87-1 10G 染色劑

人肺泡上皮細(xì)胞裂解物HPAEpiCLDibutylphosphate嶙酸二丁酯250克AR，97%

鼬肺上皮細(xì)胞;MV-1-Lu *癌細(xì)胞，PANC-1細(xì)胞 3T3 clone A31細(xì)胞，小鼠胚胎成纖維細(xì)胞L-Leucine 25g/100g/250g/500g 國產(chǎn)
ACP5 Others Human 人 ACP5 / AP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-丙氨酸異丙酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%L-Alanine isopropyl ester

CL-0402NCI-H520(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2L-天冬酰胺甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：0.98Methyl L-asparaginate mono

IFNA1 Others Rat 大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-天冬氨酸二叔丁基酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRL-Aspartic acid di-tert-butyl ester

小鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLPD0325901質(zhì)量規(guī)格：>99%,ATP非競爭性的MEK抑制劑PD-0325901

U266人細(xì)胞 U266 human myeloma cell 1640+15% FBS西他塞坦鈉/司他生坦鈉質(zhì)量規(guī)格：度99%Sitaxsentan ; TBC-11249; Thelin
人雪旺細(xì)胞HSC4,4'-二壬氧基氧化偶氮苯質(zhì)量規(guī)格：4,4'-Dinonyloxyazoxybenzene

SLC27A4 Others Human 人 SLC27A4 / FATP4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4'-(反-4-戊基環(huán)己基)二苯基-4-甲腈(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)4'-(trans-4-Amylcyclohexyl)biphenyl-4-carbonitrile

犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)4-戊氧基苯(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)4-Amyloxybenzaldehyde

敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21 細(xì)胞，TE-10細(xì)胞 MA-104細(xì)胞，猴腎細(xì)胞系4-丁氧基苯(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)4-Butoxybenzaldehyde

SK-N-SH, 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 Human4,4'-二羥基二苯(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)4,4'-Dihydroxydiphenyl Ether
大額牛腎細(xì)胞形態(tài)CD40 Others Mouse 小鼠 CD40 / TNFRSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 碲標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml，基體:HCI)Tellurium standard質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml，基體:HCI

MSTO-211H 人細(xì)胞株銩標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL,基體：10%HCL)Thulium standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mL,基體：10%HCL

NCI-H1299人非小細(xì)胞細(xì)胞 NCI-H1299 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑：水)Vanadium standard質(zhì)量規(guī)格：500mg/L,溶劑：水

GRN Protein Mouse 重組小鼠 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 (His 標(biāo)簽)釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(100mg/L,基體:1%HCI)Vanadium standard質(zhì)量規(guī)格：100mg/L,基體:1%HCI

人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17 人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鐿標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)Ytterbium standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml
收到大額牛腎細(xì)胞形態(tài)處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。