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資源名稱　二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞
種屬:CHO/dhFr-

形態(tài):上皮細胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:DMEM/F12(1:1):Ham＇sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBS　

生長特性:貼壁生長

培養(yǎng)操作步驟：
二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞說明書產(chǎn)品僅用于科研1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。 
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
293A (人胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H035人腸內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL 人上皮細胞RNAHBEpiC miRNA5 μg戊二酸(>質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRGlutaric acid

CM-R103大鼠腦平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL戊二1(>96%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>96%,BRGlutaric anhydride

CHST11 Others Human 人 CHST11 / C4ST-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 硫酸博萊霉素/博來霉素/爭光霉素質(zhì)量規(guī)格：含量1.5~2.0U/mg,BRBleomycin sulfate

小鼠小膠質(zhì)細胞MM硼替佐米/保特佐米質(zhì)量規(guī)格：含量> 99%Bortezomib

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1 膀胱變移細胞癌，T-24細胞 U251(細胞)硼替佐米(標(biāo)準品)質(zhì)量規(guī)格：>99%,光學(xué)度>98%,標(biāo)準品Bortezomib
B95-8細胞，EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細胞 人細胞,CL187/CCL187細胞 CM-H125人腦成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL匹格列酮-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進口Pioglitazone-d4

大鼠肝細胞;BRL 3A羥基匹格列酮（M-Ⅶ）質(zhì)量規(guī)格：美國進口Hydroxy Pioglitazone (M-VII)

GDF15 Others Human 人 GDF-15 人細胞裂解液 (陽性對照) 5-去乙基5-羧基匹格列酮質(zhì)量規(guī)格：美國進口5-Desethyl 5-Carboxy Pioglitazone

小鼠胚胎成纖維細胞MEF酮基匹格列酮（M-Ⅲ）質(zhì)量規(guī)格：美國進口Keto Pioglitazone (M-III)

MARK3 Others Human 人 MARK3 / CTAK1 / EMK-2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 磺胺嘧啶鈉(標(biāo)準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準品 sulfadiazine(SD-Na)
IL12RB2 Others Mouse 小鼠 IL12RB2 / IL12R-beta 2 人細胞裂解液 (陽性對照) N-叔丁氧羰基-L-，英文名或英文縮寫：Boc-L-alaninol，級別：BR，98%，規(guī)格：1克

人細胞;A549 [A-549]安基加醋芐酯 Bqnzyl ccrbcmctq 61-84-1

CLEC4B2 Others Rat 大鼠 CLEC4B2 / mDCAR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-25 Medium 9041-35-4 25G 分離試劑

CL-0425RKO-AS45-1(人轉(zhuǎn)基因細胞)5×106cells/瓶×25′-UMP，2Na尿苷-5′-單嶙酸二鈉鹽250毫克高，98%

XJH細胞，B細胞 人男性正常細胞系,HS68細胞 人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810](麥芽提取瓊脂)
二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞說明書人臍帶平滑肌細胞 (HUVSMC)( 5×105 ) SKOV3/Taxol-25, 人紫杉醇耐藥細胞株 Human多拉菌素Doramectin質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

人男性正常細胞;Hs683,3,5-三-L-甲狀腺原氨酸，塞羅寧3,3',5'-Triiodo-L-thyronine質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

CD2 Others Rat 大鼠 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照) Corylifol A(標(biāo)準品)Corylifol A質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98,標(biāo)準品

人輸尿管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL溴芬酸鈉Bromfenac 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

B16BL6細胞，小鼠色素瘤細胞 VERO C1008 (E6)(非洲綠猴腎細胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KM932溴芬酸鈉(標(biāo)準品)Bromfenac 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99,標(biāo)準品
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線