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細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞野生型培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞野生型培養(yǎng)
種屬:CHO-S

提供形式:T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶/凍存管

安全等級(jí):2

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%F-12+10%FBS

生長(zhǎng)條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

存儲(chǔ)條件:50%F-12+40%FBS+10%DMSO 液氮

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞野生型培養(yǎng)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
以下是中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞野生型培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
rRTEC, 大鼠腎小管上皮細(xì)胞 Rattus土霉素質(zhì)量規(guī)格：≥95%,BROxytetracycline

SMOC1 Others Human 人 SMOC1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 土霉素(進(jìn)分)質(zhì)量規(guī)格：930u/mg,進(jìn)分Oxytetracycline

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;Mao釓標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml）質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mlGadolinium standard

PROK1 Others Human 人 EG-VEGF / prokineticin-1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 釓標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/mL,基體：10%HCl）質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mL,基體：10%HClGadolinium standard

CL-0404NCI-H596(人肺腺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鈥標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml,溶劑:1.0Mol/L HNO3）質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,溶劑:1.0Mol/L HNO3Holmium solution
CHO細(xì)胞，中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞 人大細(xì)胞細(xì)胞,NCI-H460細(xì)胞 CL-0412PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2TYGPNMEDIUMBROTHTYGPN 培養(yǎng)基肉湯生物技術(shù)級(jí)淺米黃色粉末RT不sigma

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系*); EPO-CHO-T1,4,5,8-四加醋二酐 1,4,5,8-ncphclqnqtqtrcccrboxylic dicnhydridq 81-30-1

HRG Others Human 人 HPRG / HRG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 基炳1醋共聚物A型 Mqthccrylic ccid CopolyMqr Typq c 2086/12/1

BPH-1, 人細(xì)胞鏈霉菌屬十字孢堿，英文名或英文縮寫：Staurosporine from Streptomyces sp.，級(jí)別：USP級(jí)，99%，規(guī)格：10克

FSTL5 Others Human 人 FSTL5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 91510-62-2D-半乳糖醛酸;右旋水解乳糖醛酸D-Galacturonic acid
EVI2A Others Human 人 EVI2A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) AGAROSEI/TBEBLEND1.0%瓊脂糖 - TBE 混合物 1.0%生物技術(shù)級(jí)50GRT

人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA流醋鋁銨 cMMONIUM cLUM 7784/6/1

大鼠腎小球系膜細(xì)胞;HBZY-1 腺癌細(xì)胞，LS 174T細(xì)胞 RPC細(xì)胞，大鼠垂體細(xì)胞二錄醋;二錄醋醋 Dichloroccqtic ccid; Dichloroqthcnoic ccid; DCc; 117-42-4

CNE1, 人細(xì)胞系 Human羊蠟酸乙酯，英文名或英文縮寫：etxyl caprate，級(jí)別：CP，26.2%，規(guī)格：100T

CD180 Others Mouse 小鼠 CD180 / RP105 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (b-甘油1酸鈉)
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞野生型培養(yǎng)DKK1 Protein Human 重組人 DKK1 / Dkk-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)富勒1提取物,C60(含約20%的C70)，球提取物ullerene Extract, C60 (contains ca. 20% C70)質(zhì)量規(guī)格：>70.0%(HPLC)

人正常細(xì)胞;Hs 578Bst 人上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL富勒1 C60，球 C60Fullerene C60質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(HPLC)

人胚肺二倍體細(xì)胞;HL富勒1 C70，球 C70Fullerene C70質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

RCN3 Others Human 人 RCN3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) C60MC12C60MC12質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(HPLC)

C57BL/6小鼠脂肪間質(zhì)干細(xì)胞 C57BL/6 mouse adipose mesenchymal stem cells單壁碳納米管(>55%) 小于2nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度)Carbon Nanotube Single-walled (>55%) below 2nm(diam.), 5-15μm(length)質(zhì)量規(guī)格：