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資源名稱　人漿細(xì)胞細(xì)胞
種屬:NCI-H929

形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；0.05Mm2-巰基乙醇

生長特性:懸浮生長

培養(yǎng)操作步驟：
人漿細(xì)胞細(xì)胞說明書產(chǎn)品僅用于科研1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
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L929-EGFP-puro小鼠成纖維細(xì)胞 L929-EGFP-puro mouse fibroblast cells MEM(NaHCO3 1.5g/L,  Pyruvate 0.11g/L)+10%FBS+8ug/ml puromycin氟尿嘧啶,5-氟脲嘧啶,5-氟尿嘧啶（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品5-Fluorouracil

NOG Protein Human 重組人 Noggin / NOG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)琥珀酸舒馬曲普坦質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRSumatriptan succinate

人肝細(xì)胞 (HH) (1×106 ) CHO, 中國倉鼠卵巢細(xì)胞系 其它磺胺-5-甲氧嘧啶(98%)質(zhì)量規(guī)格：>98%Sulfameter

KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株;G422雙甲脒（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品Amitraz

MVK Others Human 人 MVK / Mevalonate kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 雙甲脒質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRAmitraz
CL-0248ZR-75-30(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2硬脂酸鈣質(zhì)量規(guī)格：BRCalcium stearate

OXSR1 Others Human 人 OXSR1 / OSR1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 香柏油質(zhì)量規(guī)格：商品級(jí)Cedar wood oil

人腎近曲小管上皮細(xì)胞cDNAHRPTEpiC cDNA硫酸鈰八水(>97%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRCerium(III) sulfate, octahydrate

SHZ-88細(xì)胞，大鼠癌細(xì)胞 人(轉(zhuǎn)染TK基因的GLC-82細(xì)胞),GLC-82-TK細(xì)胞 肺泡上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)Br-Mmc (=4-溴甲基-7-甲氧基)(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)Br-Mmc (=4-Bromomethyl-7-methoxycoumarin)

犬胸腺細(xì)胞;cf2Th3-溴甲基-7-甲氧基-1,4-苯并惡嗪-2-酮(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one
STXBP3 Others Human 人 STXBP3 / UNC-18C 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (S)-鹽酸氟西汀-d5 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口(S)-Fluoxetine-d5

盤羊皮膚細(xì)胞;OAM-S1氟西汀琥珀酰胺酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Fluoxetine Succinamic Acid

NRK細(xì)胞，大鼠腎細(xì)胞 人原位*腺癌細(xì)胞,BxPC-3細(xì)胞 CM-R117大鼠視網(wǎng)膜muller細(xì)胞100mL鹽酸氟西汀-d5質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Fluoxetine-d5

大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化);PC-12(高分化)(S)-鹽酸氟西汀質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口(S)-Fluoxetine

PDCD1LG2 Others Human 人 PD-L2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (R)-鹽酸氮卓斯汀質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口(R)-Azelastine
人漿細(xì)胞細(xì)胞說明書OS-RC-2細(xì)胞，細(xì)胞 小細(xì)胞,SH-77細(xì)胞 人Wilms細(xì)胞;G401癸氟奮乃靜（標(biāo)準(zhǔn)品）Fluphenazine Decanoate質(zhì)量規(guī)格：含量測定

KM小鼠子瘤株;U14鹽酸多巴酚丁胺（標(biāo)準(zhǔn)品）Dobutamine 質(zhì)量規(guī)格：含量測定

ICOSLG Others Mouse 小鼠 B7-H2 / CD275 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 苯妥英（標(biāo)準(zhǔn)品）5,5-Diphenylhydantoin質(zhì)量規(guī)格：供IR鑒別用

人胚胎;WI-38金剛烷（標(biāo)準(zhǔn)品）Adamantane質(zhì)量規(guī)格：供檢查用

大鼠脊柱神經(jīng)細(xì)胞(RSCMN)(1×106)鹽酸普羅帕酮（標(biāo)準(zhǔn)品）Propafenone 質(zhì)量規(guī)格：供檢查用
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線