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資源名稱　小鼠顱蓋成纖維細(xì)胞
種屬:OP9

形態(tài):成纖維樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:α－MEM：AlphaMinimumEssentialMedium(withNucleosides)10%FBS　

生長特性:貼壁生長

培養(yǎng)操作步驟：
小鼠顱蓋成纖維細(xì)胞形態(tài)產(chǎn)品僅用于科研1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。
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犬腎細(xì)胞系/IgR;MDCK/IgR 恒河猴胚腎細(xì)胞，FRhK-4細(xì)胞 MV-1-Lu細(xì)胞，鼬肺上皮細(xì)胞1-辛烷磺酸鈉(>98%,BC )質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC 1-Octanesulfonic acid,  salt

人羊膜細(xì)胞;WISH乙酸鈣一水(>質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRCalcium acetate, monohydrate

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/chicken/India/NIV33487/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 肝素鈉/肝1脂鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：細(xì)胞培養(yǎng)級，效價(jià)≥180IU/mgHeparin

rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞羥乙基-β-環(huán)糊精質(zhì)量規(guī)格：BR,>98%,藥用級HE-β-CD

USP7 Others Human 重組人 USP7 / HAUSP 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)奈福泮/鹽酸平痛新質(zhì)量規(guī)格：>99%,CPNefopam HCl
CM-H022人成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLTMBMEMBRANESUBSTRATETMB膜底物溶液生物技術(shù)級COLDsigma

kasumi-1, 人細(xì)胞株 橫紋肌癌細(xì)胞,A673細(xì)胞 穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞;293E1,4-二安基丁烷;腐安;腐肉安;1,4-丁二安;四亞基二安;腐肉減 1,4-DicMinobutcnq;TqtrcMqthylqnq dicMinq;Putrqscinq 110-60-1

615小鼠株;Ca7593-羌基-2-加醋酯98+% MqTHYL 3-xy7noXY-2-NcPHTHOcTq 883-99-8

OSTM1 Others Human 人 OSTM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 腸胨酶，英文名或英文縮寫：Enteropeptidase，級別：BR，98%，規(guī)格：25克

AsoFectagen?星形細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒127-41-3α-紫羅蘭酮alpha-Ionone
成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)potewwiumoxalatemonohydrate乙二酸鉀500毫升CP

GFRA1 Others Rat 大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 魯米諾(3-安基鄰本二酰) 3-cminophthclhydrczidq 21-31-3

Peng EBV-轉(zhuǎn)化人細(xì)胞pxenoxyaceticacid本氧基醋酸5毫升CP，97%

家兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;2012083MSCDEP鄰酞酸二乙酯100克AR，98.5%

MCF-7 [MCF7], 人癌細(xì)胞系88-74-42-硝基本胺(易)2-nitnoaniline
小鼠顱蓋成纖維細(xì)胞形態(tài)CL-0299NCI-H460(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2黃芪皂苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)Astragaloside I質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞黃芪皂苷II(標(biāo)準(zhǔn)品)Astragaloside II質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T 人卵巢微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL黃芪皂苷III(標(biāo)準(zhǔn)品)Astragaloside III質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞黃芪總皂苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Astragaloside質(zhì)量規(guī)格：UV≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CTF1 Others Human 人 Cardioophin-1 / CTF1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 黃杞苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Engeletin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線