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細(xì)胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
DMEM 培養(yǎng)基 （高糖）培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　DMEM 培養(yǎng)基 （高糖）培養(yǎng)
提供形式:500ml，液體

模式菌株:未知

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到DMEM 培養(yǎng)基 （高糖）培養(yǎng)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
以下是DMEM 培養(yǎng)基 （高糖）培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
MSTN Protein Mouse 重組小鼠 GDF-8 / Myostatin / MSTN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:0.5mol/L HNO3)質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,溶劑:0.5mol/L HNO3Vanadium solution

人成纖維細(xì)胞(HPrF)(5×105) 人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 Human釔標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml in 10% HCl)質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml in 10% HClYttrium standard

tTA基因修飾的小鼠*癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6鈦鐵試劑(AR)質(zhì)量規(guī)格：ARTiron

人腦膜細(xì)胞 (HMC)( 5×105 )鈦鐵試劑(95%)質(zhì)量規(guī)格：0.95Tiron

腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)四溴酚酞乙酯鉀鹽質(zhì)量規(guī)格：INDTBPE
CXCL14 Protein Human 重組人 CXCL14 / BRAK 蛋白蛇床子素（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Osthole

MRC-5(人胚 ) 5×106cells/瓶×2 小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 蛇床子素質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BROsthole

正常大鼠腎細(xì)胞;NRK麝香酮（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：GC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Muscone

心肌細(xì)胞 (HCMa) (1×106 )升麻醇-3-O-β-D-吡喃木糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Cimigenol-3-O-β-D-xylpyranoside

T-110A透明質(zhì)酸酶(含10mL酶解緩沖液)1mL山梨酸鉀（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Potassium Sorbate
人顱骨造骨細(xì)胞裂解物HCOL衣霉素，英文名或英文縮寫：Tunicamycin from Streptomyces lysosuperficus，級(jí)別：組織培養(yǎng)級(jí),γ-射線滅菌,10mg/ml，規(guī)格：100克

IL2RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL2RA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1-(4-安本基)醇 1-(4-cMINOPHqNYL)qTHcNOL 1427-89-2

小鼠瘤細(xì)胞;EL4孔雀石綠;中國(guó)綠;本安綠;減性孔雀石綠;品綠;鹽基塊綠 Mclcchitq grqqn;Chinc grqqn;Light grqqn N;Victoric grqqn B;Victoric grqqn WB;Nqw victoric grqqn qxtrc O;DicMond grqqn B,BX;Mclcchitq grqqn chloridq;Mclcchitq grqqn oxclctq 269-64-

LX-2細(xì)胞，人肝星形細(xì)胞正常 人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞,HFSF細(xì)胞 家貓肺細(xì)胞;FCA-L2馬來(lái)酸二，英文名或英文縮寫：Dimetxyl ，級(jí)別：BR，95%，規(guī)格：500克

LoVo(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×23105-95-1L-派啶-2-羧酸L(-)-Pipecolinic acid
DMEM 培養(yǎng)基 （高糖）培養(yǎng)大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A京尼平甙(標(biāo)準(zhǔn)品)Geniposide質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%, 標(biāo)準(zhǔn)品

MICB Others Human 人 MICB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 京尼平甙Geniposide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HCMSC甲睪酮; 甲基素17-Methyltestosterone質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

FLRT2 Others Human 人 FLRT2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 四氫生物蝶呤游離堿Tetrahydro-L-Biopterin free base質(zhì)量規(guī)格：>99%

HK-2 人腎近曲小管上皮細(xì)胞鹽酸替羅非班Tirofiban HCl質(zhì)量規(guī)格：>99%,一水物，BR