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大鼠腎足突細胞（原代）形態(tài)冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　大鼠腎足突細胞（原代）形態(tài)
種屬:Rat Kidney Podocytes

提供形式:凍存管/T25細胞培養(yǎng)瓶

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:DMEM/F12 添加因子：FBS BFGF Insulin Penicillin Streptomycin 等

傳代方法:該細胞為原代細胞，穩(wěn)定傳5-10代

生長條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

生長特性:貼壁

存儲條件:50%完全培養(yǎng)基+40%FBS+10%DMSO 液氮
細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是大鼠腎足突細胞（原代）形態(tài)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
CLEC14A Others Mouse 小鼠 CLEC14A / EGFR-5 人細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢哌酮(標準品)質(zhì)量規(guī)格：含量測定Cefoperazone Acid

倉鼠/小鼠雜交瘤細胞;145-2C11羅丹明6G/堿性紅1/玫瑰紅6G質(zhì)量規(guī)格：BSRhodamine 6G

IL11RA Others Canine 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人細胞裂解液 (陽性對照) 維多利亞藍B,堿性藍 26質(zhì)量規(guī)格：BSVictoria blue B

WM451, 人色素瘤細胞考馬斯亮藍R250質(zhì)量規(guī)格：BSBrilliant Blue R

HPB-ALL細胞，T細胞細胞 人細胞高轉(zhuǎn)移亞系,PC-3M 1E8細胞 人*成纖維細胞總RNAHCF NA考馬斯亮藍G250質(zhì)量規(guī)格：BSBrilliant Blue G
EPHA6 Others Mouse 小鼠 EPHA6 / EHK-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 苯氧乙酸鈉(>Phenoxyaceti acid  salt質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人骨骼肌細胞總RNAHSkMC NA水楊酸苯酯(>Phenyl salicylate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

EDA2R Others Cynomolgus 食蟹猴 XEDAR / EDA2R 人細胞裂解液 (陽性對照) 1脂酶A2Phospholipase A2 from Crotalus adamanteus Venom質(zhì)量規(guī)格：比活性：>200U/mg，BC

中國倉鼠卵巢細胞(亞系*);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6對尼泊金丁酯鈉(>98%,USP)p-Hydroxybenzoic acid butyl ester  salt質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP

MIApaca-2細胞，人*癌細胞 人成纖維細胞,HT1080細胞 615小鼠瘤株;HP615尼泊金乙酯鈉(>98.5%,BR)p-Hydroxybenzoic acid ethyl ester  salt質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR
BACE2 Others Mouse 小鼠 BACE2 / Beta secretase 2 人細胞裂解液 (陽性對照) 苯硫(分析標準品,>99%(GC）)Diphenyl sulfide質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,>99%(GC）

人主動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL4,4'-二氨基二苯(ODA)(標準品)4,4′-Diaminodiphenyl ether質(zhì)量規(guī)格：分析標準品

S-180細胞，小鼠細胞 THP-1(單核細胞) 人細胞;C-33A二十二烷(分析標準品,≥99.5%(GC))Docosane質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,≥99.5%(GC)

集落刺激因子4,4'-二氨基二苯硫(標準品)4,4'-Thiodianiline質(zhì)量規(guī)格：分析標準品

SW579(人甲狀腺鱗癌細胞 ) 5×106cells/瓶×2 甲型 H1N1 (A/USSR/90/1977) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 丙位十二內(nèi)酯(分析標準品,≥98.5%(GC)) γ-Dodecalactone質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,≥98.5%(GC)
大鼠腎足突細胞（原代）形態(tài)U251(人細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6苦玄參苷IV(標準品)Picfeltarraenin IV質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品

人腎近曲小管上皮細胞裂解物HRPTEpiCL瓜子金皂苷XXXI(對照品)Polygalasaponin XXXI質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品

HA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 俾斯麥棕RBismarck Brown R質(zhì)量規(guī)格：BS

小鼠瘤細胞(NK靶細胞);YAC-1俾斯麥棕YBismarck Brown Y質(zhì)量規(guī)格：BS

tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-4D6 膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL偶氮氯膦IChlorophosphonazo Ⅰ質(zhì)量規(guī)格：AR,顯色劑
收到大鼠腎足突細胞（原代）形態(tài)處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。