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細(xì)胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
兔軟骨細(xì)胞培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　兔軟骨細(xì)胞培養(yǎng)
種屬:chondrocyte rabbit（rabbit cartilage cell）

安全等級:1

模式菌株:未知

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到兔軟骨細(xì)胞培養(yǎng)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。
以下是兔軟骨細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氧化鈣(塊)(>質(zhì)量規(guī)格：>98%，BRCalcium oxide lump

Malmc細(xì)胞，人皮膚纖維微細(xì)胞系 光滑念珠菌 雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F31酸二氫鈣一水(85%~95%,BR)質(zhì)量規(guī)格：85%~95%,BRCalcium phosphate, monobasic, monohydrate

PPBP Protein Human 重組人 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (His 標(biāo)簽)無水硫酸鈉(分析標(biāo)準(zhǔn)品,pestizides≤1 ppm)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,pestizides≤1 ppm sulfate anhydrous

MDA-MB-435S(人導(dǎo)管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD1 / PDCD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甲嘧磺隆(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Sulfometuron-methyl

倉鼠卵巢細(xì)胞;Lec1西草凈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,97%)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,97%Simetryne
ERBB3 Others Human 人 ErbB3 / HER3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 延胡索乙素；消旋延胡索乙素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,BRTetrahydropalmatine

小香豬皮膚細(xì)胞;SSC-S2延胡索乙素；消旋延胡索乙素質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,BRTetrahydropalmatine

SPN Others Rat 大鼠 SPN / CD43 / Sialophorin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 孕1醇酮醋酸酯,孕1諾龍乙酸酯質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRPregnenolone Acetate

CL-0165NCI-H1299(人非小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2孕1醇酮醋酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Pregnenolone Acetate

L129細(xì)胞，NCTC*929細(xì)胞 人Butt`s瘤細(xì)胞,Raji細(xì)胞 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞;BV2靈芝醛A(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品Ganoderal A
TCN2 Others Mouse 小鼠 TCN2 / anscobalamin-II 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Toosendanin苦楝素10毫克超，98%

PA319 人細(xì)胞二十二醇 1-Docoscnol 661-19-8

CL-0466WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化)5×106cells/瓶×2L-正纈酸shēng huà shì jì容量：1公斤

小鼠神經(jīng)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)wo7iumphosphotungstate十二鎢酸嶙酸鈉水合物500克CP，98%

人細(xì)胞;1301 人腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL589-92-44-甲基4-metxylcyclohexanone
兔軟骨細(xì)胞培養(yǎng)CM-H013人小氣道平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL奎寧單鹽酸鹽二水合物Quinine  dihydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%

MOLT-4細(xì)胞，急性母細(xì)胞細(xì)胞 髓性細(xì)胞,TT細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞(傣族);KM94031-甲基-1,2,4-三唑1-METHYL-1,2,4-TRIAZOLE質(zhì)量規(guī)格：>98%

615小鼠T細(xì)胞性瘤株;L7712甲啶鉑,吡鉑Picoplatin質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

CD3E Others Human 人 CD3E 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-硝基芐瞇鹽酸鹽4-NitrobenziMidaMide HCl質(zhì)量規(guī)格：>97%

人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2脲,尿素Urea質(zhì)量規(guī)格：AR