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乳酸乳球菌組成型表達質(zhì)粒培養(yǎng)冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　乳酸乳球菌組成型表達質(zhì)粒培養(yǎng)
種屬：pMG36e

提供形式：20μl

模式：菌株未知

培養(yǎng)方法

傳代方法：收到質(zhì)粒后請短暫離心，取2μl轉(zhuǎn)化至對應感受態(tài)中，挑取單*重新提取質(zhì)粒后使用。如需獲取其他詳細信息請聯(lián)系QQ客服查詢。
細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是乳酸乳球菌組成型表達質(zhì)粒培養(yǎng)的相關熱銷產(chǎn)品：
WISH(人羊膜細胞) 5×106cells/瓶×21,4,8,11-四氮雜環(huán)十四烷(>98.0%(T))1,4,8,11-Tetraazacyclotetradecane質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

HCASMC-c 人平滑肌細胞(HCASMC) 500,000cells 小腸隱窩上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷三鹽酸鹽(>98.0%(N)(T))1,4,7-Triazacyclononane Tri質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(N)(T)

肝竇內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-yl)乙醇-d42-(6-Amino-9H-purin-9-yl)ethanol-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進口

CST9L Others Human 人 CST9L / Testatin 人細胞裂解液 (陽性對照) N-6-(δ2-異戊1基)-腺嘌呤N-6-(δ2-Isopentenyl)-adenine質(zhì)量規(guī)格：美國進口

大鼠骨骼肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL9-(2',3',5'-三-氧基-苯甲基-β-D-阿糖)腺嘌呤9-(2',3',5'-Tri-O-benzyl-β-D-arabinofuranosyl)adenine質(zhì)量規(guī)格：美國進口
MCF 7B(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 BHK(幼倉鼠腎細胞)21-辛酸酯質(zhì)量規(guī)格：美國進口Hydrocortisone 21-caprylate

原代神經(jīng)膠質(zhì)細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml21-半琥珀酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進口Hydrocortisone 21-hemisuccinate  salt

SHH Others Human 人 SHH / Sonic hedgehog (aa 1-197) 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-(O-羧甲基)1質(zhì)量規(guī)格：美國進口Hydrocortisone 3-(O-carboxymethyl)oxime

大鼠子宮頸上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL21-半琥珀酸酯質(zhì)量規(guī)格：美國進口Hydrocortisone 21-hemisuccinate

Reh人急性非B非T細胞 Reh human acute non B non T lymphocytic leukemia IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS氫化大豆卵1脂;氫化卵1脂質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRHSPC;Lecithins Hydrogenated
CD5 Others Rat 大鼠 CD5 人細胞裂解液 (陽性對照) NEXTGEL7.5%ACRYLAMIDESOLNPROTNNEXT GEL 7.5%蛋白組學級500MLRT

人胎盤羊膜細胞完全培養(yǎng)基 100mL(1S)-(-)-莰烷酰錄 (-)-Ccmphcnic ccid chloridq 39637-74-6

SAC-II B2細胞，小鼠腹水瘤細胞 BRL 3A(大鼠肝細胞) 人皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1洛伐他汀相關物質(zhì)A Lovcstctin Rqlctqd CoMpound c;dixy7no-lovcstctin 77217-9-4

CCL11 Protein Human 重組人 CCL11 蛋白 (His 標簽)INDOXYL-B-DGLUCOSIDE吲哚-beta-D-葡萄糖苷100MGFROZEN

RD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 人細胞裂解液 (陽性對照) N-芴甲氧羰酰基-D-本酸NA
乳酸乳球菌組成型表達質(zhì)粒培養(yǎng)HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞 Human培哚普利?；?/span>-α-D-葡萄糖苷酸Perindopril Acyl-α-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進口

MEP1A Others Human 人 MEP1A / PPHA 人細胞裂解液 (陽性對照) 培哚普利?；?/span>-β-D-葡萄糖苷酸Perindopril Acyl-β-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進口

人主動脈內(nèi)皮細胞裂解物HAECL匹伐他汀內(nèi)酯Pitavastatin Lactone質(zhì)量規(guī)格：美國進口

TNFSF13B Others Cynomolgus 食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 人細胞裂解液 (陽性對照) 哌唑嗪Prazosin質(zhì)量規(guī)格：美國進口

C3H/An小鼠結(jié)締組織細胞(L929-TK-);LTK-哌唑嗪-d8Prazosin-d8質(zhì)量規(guī)格：美國進口
收到乳酸乳球菌組成型表達質(zhì)粒培養(yǎng)處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。