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資源名稱　人食管鱗癌細(xì)胞
種屬：KYSE70

提供形式：T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶/凍存管

模式：菌株未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：90%高糖DMEM+10%FBS

生長(zhǎng)條件：95%空氣+5%二氧化碳37攝氏度

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

存儲(chǔ)條件：50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮

培養(yǎng)操作步驟：
人食管鱗癌細(xì)胞說(shuō)明書產(chǎn)品僅用于科研1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
SFTPD Others Mouse 小鼠 SFTPD 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 異鳥苷水合物Isoguanosine Hydrate質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

狗腎惡性癥細(xì)胞;DH823,5-O-(1,1,3,3-四異丙基-1,3-二硅氧烷)腺苷3',5'-O-(1,1,3,3-Tetraisopropyl- 1,3-Disloxanediyl)Adenosine  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

FGFR2 Others Human 人 FGFR2 / CD332 (aa 400-821) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 21-乙酰氧基孕1醇酮21-Acetoxypregnenolone質(zhì)量規(guī)格：BR,美國(guó)進(jìn)口

CL-0113HO-8910(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2珊瑚菜內(nèi)酯，珊瑚菜素(標(biāo)準(zhǔn)品)phelloptorin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

THP-1人單核細(xì)胞 低分化腺癌細(xì)胞,HCT-116細(xì)胞 SK-MES-1(肺鱗癌細(xì)胞)鞣花酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Ellagic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 舒林酸（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：檢查Sulindac

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系*);CHO-HCV-E2HSP990質(zhì)量規(guī)格：>98%,Hsp90抑制劑NVP-HSP990

中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞;R 1610 [R1610] 口腔表皮樣癌細(xì)胞，KB細(xì)胞 CIK細(xì)胞，草魚*細(xì)胞鹽酸妥拉唑林（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Tolazoline HCl

人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞;HFSF鹽酸硫利達(dá)嗪（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：鑒別Thioridazine

HA Others H13N8 甲型 H13N8 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 慶大霉素（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定Gentamicin
3T3TK細(xì)胞，小鼠成纖維細(xì)胞 TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞,JEG-3-VP16-TNFa細(xì)胞 人滑膜細(xì)胞RNAHS miRNA5 μgTHIOUREA蛋白組學(xué)級(jí)500G62-56-6RT

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1(±)新煙減 (-)-cNcBcSINq 13078-04-1

EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-本炳安醇 L-Phqnylglycinol 318-92-4

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;Caco-2L-天冬酸5克RT

USP46 Others Human 人 USP46 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-芴甲氧羰酰基-L-蛋酸NA
人食管鱗癌細(xì)胞說(shuō)明書TACSTD2 Others Human 人 OP2 / TACSTD2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 漆黃素Fisetin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%,BR

山羊皮膚成纖維樣細(xì)胞;DG-S1漆黃素（標(biāo)準(zhǔn)品）Fisetin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

PDCD1LG2 Others Mouse 小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 奇任醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Kirenol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

HuTu-80 人十二指腸腺癌細(xì)胞千層紙素A(標(biāo)準(zhǔn)品)Oroxylin A質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

WERI-Rb-1人視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞 WERI-Rb-1 human retinal glial cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS千金子二萜醇二乙酰苯甲酰酯（標(biāo)準(zhǔn)品）5,15-Diacetyl-3-benzoyllathyrol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線