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人大細胞細胞培養(yǎng)來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務。產(chǎn)品僅用于科研

資源名稱　人大細胞細胞
種屬：NCI-H661

類型：肺

形態(tài)：上皮細胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：RPMI-1640(GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)操作步驟：
人大細胞細胞培養(yǎng)產(chǎn)品僅用于科研1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
CL-0241VCaP(人細胞)5×106cells/瓶×2草酸鋰(>Lithium oxalate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

HUVEC-12, 人臍內(nèi)皮細胞系 昆蟲卵巢細胞，SF9細胞 NK-92(人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細胞)硬脂酸鋰(>Lithium stearate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人導管癌細胞;ZR-75-303,5-二-L-酪氨酸3,5-Diiodo-L-tyrosine dihydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

CHIT1 Others Human 人 CHIT1 / Chitinase-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 氟氯西林鈉(標準品)Flucloxacillin 質(zhì)量規(guī)格：含量測定，標準品

恒河猴腎細胞;MMK2巴利森苷A；派立辛Parishin A質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
NP Others H1N1 甲型 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 硬脂酸鉀(>質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRPotassium stearate

人胚胎腸粘膜組織來源細胞;CCC-HIE-21酸鉀一水(>質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRPotassium tartrate, hydrate

大鼠雪旺細胞;RSC96 橫紋肌瘤細胞，A-673細胞 SNL細胞，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染了neor和LIF基因的STO細胞株亞碲酸鉀(>質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRPotassium tellurite

lovo, 人細胞 Human四草酸鉀二水(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRPotassium tetraoxalate dehydrate

CD34 Others Mouse 小鼠 CD34 人細胞裂解液 (陽性對照) 骨抑制素，人質(zhì)量規(guī)格：>95%,BROsteostatin (human)
MHCC-97L人細胞(低轉(zhuǎn)移) MHCC-97L human hepatoma cells (low metastasis) DMEM+10%FBS聚乙二醇8000250克RT

TNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白姆沙伯 P NAW ChroMosorb P NcW;

人結(jié)膜纖維原細胞(HConF)(5×105 ) HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞 Human聚乙二醇 3000 Poly(ethylene glycol) 3,000 (PEG 3000) 25322-68-3 250G 通用試劑

人導管癌細胞;ZR-75-30M-FC瓊脂25毫升

ENPEP Others Rat 大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A (aa 41-945) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (D-果糖-6-1酸二鈉)
人大細胞細胞培養(yǎng)OP9 小鼠骨髓基質(zhì)細胞曲昔匹特（標準品）Troxipide質(zhì)量規(guī)格：含量測定

豬腎細胞;PK-15香蜂草苷(標準品)Isosakuranetin 7-O-rutinoside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

BPH-1, 人細胞鹽酸萘替芬（標準品）Naftifine 質(zhì)量規(guī)格：含量測定

人結(jié)細胞;T84 大鼠甲狀腺上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL碳酸鈣（標準品）Calcium carbonate質(zhì)量規(guī)格：含量測定

神經(jīng)元細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)甲磺酸氨氯地平（標準品）Amlodipine mesylate質(zhì)量規(guī)格：含量測定
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線