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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX3728 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細胞形態(tài) | 成淋巴細胞狀 |
是否是腫瘤細胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 外周血 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
人T淋巴細胞(干細胞庫保藏) 冷凍保存細胞之方法:
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟:
資源名稱 人T淋巴細胞(干細胞庫保藏)
種屬:Jurkat
類型:外周血
形態(tài):成淋巴細胞狀
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:RPMI 1640 Medium (Invitrogen, 11875-093) 90 ml FBS (Gibco) 10 ml 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。
生長特性:懸浮生長
細胞分類:
第一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程:
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是人T淋巴細胞(干細胞庫保藏) 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
IV型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL4,4'-二氟二苯甲酮(>99.0%(GC))4,4'-Difluorobenzophenone質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)
Eca-109-GFP-puro(pLVT7慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人細胞 Eca-109-GFP-puro (pLVT7 leiviral consuct stable sain) in human esophageal cancer cells 1640+10% FBS+2μg/ml puromycin1,4-二芐氧基苯(>98.0%(GC))1,4-Dibenzoylbenzene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
IL5 Protein Mouse 重組小鼠 IL5 蛋白 (His 標簽)3,3',4,4'-二苯基砜四羧酸二1(>97.0%(HPLC)(T))3,3',4,4'-Diphenylsulfonetetracarboxylic Dianhydride質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T)
人內(nèi)殼細胞(HHirSC)( 5×105 ) mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細胞-骨髓 Mouse二苯基砜-4,4'-二氯-3,3'-二磺酸二鈉(>98.0%(HPLC)(T))Di Diphenylsulfone-4,4'-dichloro-3,3'-disulfonate質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
恒河猴胚腎細胞;FRhK-4 [FRhK4]雙酚 C(>98.0%(GC))2,2-Bis(4-hydroxy-3-methylphenyl)propane質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L]小鼠成纖維細胞 NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L] mouse fibroblast cells MEM(NaHCO3 1.5g/L, Pyruvate 0.11g/L)+10%FBSDL-鳥氨酸鹽酸鹽(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCDL-Ornithine, mono
IL1B Protein Human 重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白DL-1酸(>99%,BP)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BPDL-Tartaric acid hydrate
PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 RSC96(大鼠雪旺細胞)D-蘋果酸(>質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRD-Malic acid
CL-0261BC-022(人癌細胞)5×106cells/瓶×2dGTP;三1酸脫氧鳥苷鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR2'-Deoxyguanosine 5'-triphosphate tri salt
IFNB1 Others Mouse 小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 人細胞裂解液 (陽性對照) dCTP;三1酸脫氧胞苷鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR2'-Deoxycytidine 5'-triphosphate di salt
MLF, 小鼠成纖維細胞外消旋N-去甲基異丙嗪質(zhì)量規(guī)格:美國進口rac N-Demethyl Promethazine
人類成纖維細胞系;CNLMG-B5538SKIN 人肝星形細胞完全培養(yǎng)基 100mL異丙嗪亞砜質(zhì)量規(guī)格:美國進口Promethazine Sulfoxide
人視網(wǎng)膜色素上皮細胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg4-羥基雷美替胺質(zhì)量規(guī)格:美國進口4-Hydroxy Ramelteon
IL2RG Others Human 人 IL2RG / CD132 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 雷美替胺代謝產(chǎn)物M-II (羥基位點R型和S型混合物)質(zhì)量規(guī)格:美國進口Ramelteon Metabolite M-II (mixture of R and S at the hydroxy position)
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-5(S)-?;疗丈?/span>-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國進口(S)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide
人T淋巴細胞(干細胞庫保藏) 人細胞;A549 [A-549]瓊脂糖(Biowest,電泳級);西班牙瓊脂糖Agarose質(zhì)量規(guī)格:進口原裝Biowest 111860;電泳級
家貓腎細胞;CATK1 肝細胞,HL-7702細胞 MMQ細胞,大鼠細胞聚乙二醇400PEG 400質(zhì)量規(guī)格:BR
人臍內(nèi)皮細胞;HUV-EC-C消膽胺樹脂;考來1胺Cholestyramine resin質(zhì)量規(guī)格:Each g exchanges 1.8 g- 2.2 g of glycocholate
RBP4 Others Mouse 小鼠 RBP4 人細胞裂解液 (陽性對照) 蔗糖Sucrose質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級
神經(jīng)前體細胞分化培養(yǎng)基NPCMD-海藻糖二水D-(+)-Trehalose, dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
收到人T淋巴細胞(干細胞庫保藏) 處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。