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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | |
品牌 | 莼試 |
貨號(hào) | CSX3673 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮樣 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 是 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
器官來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
免疫類型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
品系 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 皮膚 |
物種來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
人惡性細(xì)胞(2013年新引進(jìn))(干細(xì)胞庫(kù)保藏)形態(tài)來(lái)源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 類型 | 佛號(hào) |
人惡性細(xì)胞(2013年新引進(jìn))(干細(xì)胞庫(kù)保藏)形態(tài) | 皮膚 | CSX3673 |
資源名稱 人惡性細(xì)胞(2013年新引進(jìn))(干細(xì)胞庫(kù)保藏)
種屬:A-375
類型:皮膚
形態(tài):上皮樣
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:DMEM (Invitrogen, 12430) 89 ml FBS (Biochrom, S4115) 10 ml Sodium Pyruvate (Invitrogen, 11360-070) 1 ml(終濃度1 mM) 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。
培養(yǎng)操作步驟:
人惡性細(xì)胞(2013年新引進(jìn))(干細(xì)胞庫(kù)保藏)形態(tài)產(chǎn)品僅用于科研1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對(duì)象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品:
CL-0022AGS(人胃腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]砜(>97.0%(GC))Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] Sulfone質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)
SF9, 昆蟲卵巢細(xì)胞二苯砜-3,3'-二磺酸二鈉鹽(>95.0%(T))Diphenylsulfone-3,3'-disulfonic Acid Di Salt質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KM9402 人大隱內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL5,10-二氫-5,10-二甲基吩嗪(>98.0%(GC)(N))5,10-Dihydro-5,10-dimethylphenazine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(N)
間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)添加物-無(wú)動(dòng)物成分MSCGS-acf雙(羰基二硫代)四硫富瓦1(>95.0%(W))Bis(carbonyldithio)tetrathiafulvalene質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(W)
CDH2 Others Mouse 小鼠 N-Cadherin / CD325 / CDH2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1,2-苯二硫醇(>95.0%(GC))1,2-Benzenedithiol質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
PTPN11 Others Mouse 小鼠 SHP2 / PTPN11 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) MK-2866質(zhì)量規(guī)格:>99%Ostarine,GTx-024
人成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLXTT鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>90%,進(jìn)分XTT salt
PA317細(xì)胞,逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝用的人胚胎成纖維細(xì)胞 小腸耶爾森氏菌 豚鼠肺細(xì)胞;GP-F1二氫獼猴桃內(nèi)酯,奇異果內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品(2,6,6-Trimethyl-2-hydroxycyclohexylidene)acetic acid lactone
CCL17 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CCL17 / TARC 蛋白 (His 標(biāo)簽)二氫獼猴桃內(nèi)酯,奇異果內(nèi)酯質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR(2,6,6-Trimethyl-2-hydroxycyclohexylidene)acetic acid lactone
NG108-15(小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)之融合細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 FAM20B / Gxk1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 乳清酸質(zhì)量規(guī)格:>98%(T),BROrotic acid
THC-8307細(xì)胞,人高分化腺癌細(xì)胞系 人低侵襲性脈絡(luò)膜色素素瘤細(xì)胞,OCM-1A細(xì)胞 綠色熒光蛋白標(biāo)記人細(xì)胞;MGC803-GFPACRYL/BIS29:1酰胺/甲叉 29:1, 40%溶液超級(jí)透明,無(wú)色溶液COLDsigma
HIC(人小細(xì)胞) 5×106cells/瓶×25--2-脫氧尿苷 5-Iodo-2′-deoxyuridine,≥99% 54-42-2 1G 通用試劑
ACE2 Others Human 人 ACE2 / ACEH 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4-基-1,2-環(huán)己二羧臘酐 Hqxcxy7no-4-mqthylphthclic cnhydridq 19438-60-9
人口腔角質(zhì)細(xì)胞HOKTRISTRIS超級(jí)白色結(jié)晶粉末至針狀晶體RTsigma
HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/England/195/2009) HA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 59-85-8對(duì)錄本4-CHLOROMERCURIBENZOIC ACID
人惡性細(xì)胞(2013年新引進(jìn))(干細(xì)胞庫(kù)保藏)形態(tài)SW620-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人細(xì)胞 SW620-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human colon cancer cells L-15+10%Hyclone 滅活血清+2μg/ml puromycin腺苷-5’-二1酸一鈉ADP.Na質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IL13 Protein Human 重組人 IL13 / ALRH 蛋白D-纖維二糖D-(+)-Cellobiose質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人齒齦成纖維細(xì)胞 (HGF)( 5×105 ) RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元 Rattus胞苷-5'-二1酸二鈉鹽(CDP.Na2)Cytidine-5'-diphosphate di salt質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S4胞苷-5'-單1酸二鈉鹽(CMP.Na2)Cytidine-5'-monophosphate Di Salt質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
SLC3A2 Others Mouse 小鼠 SLC3A2 / CD98 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) TFA-aa-UTFA-aa-U質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線