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資源名稱　人細(xì)胞
種屬：HCT 116

類型：貼壁生長(zhǎng)

形態(tài)：上皮樣細(xì)胞，結(jié)

分離基物：腺癌；男性

提供形式：T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶/凍存管

安全等級(jí)：1

模式：菌株未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：90%RPMI-1640+10%FBS

傳代方法：消化時(shí)間小于30秒。

生長(zhǎng)條件：95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

生長(zhǎng)特性：復(fù)蘇第二天，細(xì)胞狀態(tài)不好，但貼壁密度還可以，第三天觀察細(xì)胞狀態(tài)好轉(zhuǎn)。

存儲(chǔ)條件：90%FBS+10%DMSO 液氮
人細(xì)胞 來(lái)源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

培養(yǎng)操作步驟：
人細(xì)胞 1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。

操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線

以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
MCF-7/Adr 腺癌/阿霉素耐藥株2,7-雙(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼環(huán)-2-基)-9,9-二正辛基芴(>98.0%(HPLC))2,7-Bis(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-9,9-di-n-octylfluorene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP-8 / CLG1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 苯并環(huán)丁1(>94.0%(GC))Benzocyclobutene質(zhì)量規(guī)格：>94.0%(GC)

貓腎細(xì)胞;CRFK9,9-二甲基-9H-9-硅芴(>98.0%(GC))9,9-Dimethyl-9H-9-silafluorene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

TNFRSF1A Others Mouse 小鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2,7-二溴菲-9,10-二酮(>97.0%(GC))2,7-Dibromophenanthrene-9,10-dione質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)

95-C 低轉(zhuǎn)移萘-1,4,5,8-四羧酸二酐(>95.0%(HPLC)(T))Naphthalene-1,4,5,8-tetracarboxylic Dianhydride質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(T)
SK-OV-3[SKOV-3]細(xì)胞，人細(xì)胞 人上皮細(xì)胞,HBE細(xì)胞 腦膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)CLA (>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)CLA

兔角膜前基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCFBFMCLA (>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)MCLA

TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) FCLA 自由酸[化學(xué)發(fā)光試劑]質(zhì)量規(guī)格：化學(xué)發(fā)光試劑FCLA Free Acid

CL-0143Lncap clone FGC(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2紅-CLA(含氮量：9.00-10.30 %)質(zhì)量規(guī)格：含氮量：9.00-10.30 %Red-CLA

CTSZ Others Human 人 CTSZ 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 13X分子篩(60-80目,氣相、液相色譜柱專用)質(zhì)量規(guī)格：60-80目,氣相、液相色譜柱專用Molecular sieves Type 13X
MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞6-氮雜尿嘧啶shēng huà shì jì容量：RT，避光25克

人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5537SKIN 人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL茜素 Alizarin,97% 72-48-0 5G 通用試劑

人上皮細(xì)胞RNAHMEpiC miRNA5 μg二言醋組安 Histcminq dixy7nochloridq 1926/9/8

PCNA Others Human 人 PCNA 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) LOADINGDYEBASE,25X25X 蛋白電泳上樣染料超級(jí)暗紫色微粘稠液體RTsigma

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO444-94-8兒價(jià)級(jí)兒流(劇毒)7m7w
人細(xì)胞 人細(xì)胞;HOS沙格列汀/沙克列汀鹽酸鹽Saxagliptin HCL質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

REG3G Others Human 人 REG3G / PAP1B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG95%）EGCG, (-)-Epigallocatechin gallate/Green Tea Extract質(zhì)量規(guī)格：茶多酚≥98%，EGCG≥95%，≤0.1%

胃粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)達(dá)沙替尼一水合物Dasatinib Monohydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

STX8 Others Human 人 STX8 / Syaxin 8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 依西美坦Exemestane (USP)質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP,Aromatase inhibitor

大鼠肝細(xì)胞;BRL依西美坦(標(biāo)準(zhǔn)品)Exemestane質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品