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資源名稱　人間變性大細胞
種屬:Karpas-299

類型:懸浮生長

分離基物:間變性大細胞；男性

提供形式:T25細胞培養(yǎng)瓶/凍存管

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%IMDM+10%FBS

生長條件:95%空氣+5%二氧化碳37攝氏度

存儲條件:90%FBS+10%DMSO 液氮
人間變性大細胞培養(yǎng)來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

培養(yǎng)操作步驟：
人間變性大細胞培養(yǎng)1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d，繪制細胞生長曲線

以下是公司正在在熱銷的產品：
BTC Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BTC / Betacellulin 蛋白 (Fc 標簽)DBD-CO-Hz [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(N-hydrazinocarbonylmethyl-N-methyl)amino-2,1,3-benzoxadiazole] 質量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

MuM-2C(人眼脈絡色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 氣管上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)NBD-CO-Hz [=4-(N-肼羰甲基-N-甲氨基)-7-硝基-2,1,3-苯并惡二唑](>95.0%(HPLC))NBD-CO-Hz [=4-(N-Hydrazinocarbonylmethyl-N-methylamino)-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole] 質量規(guī)格：>95.0%(HPLC)

腦膜細胞培養(yǎng)基MenCMBOC-硝基-L-精氨酸Boc-Arg(NO2)-OH質量規(guī)格：>99%,BR

EDA2R Others Cynomolgus 食蟹猴 XEDAR / EDA2R 人細胞裂解液 (陽性對照) 叔丁氧羰基-N-beta-三苯甲基-L-天門冬酰胺Boc-N-beta-Trityl-L-asparagine 質量規(guī)格：>98%,BR

人張氏肝細胞;Chang liverN-叔丁氧羰基-N'-氧蒽基 -L-天門冬酰胺 Boc-Asn-(Xan)-OH質量規(guī)格：>98%,BR
TM4(正常小鼠Sertoli細胞) 5×106cells/瓶×2 SK-HEP-1(人細胞)D-1酸(>99%，BC)質量規(guī)格：>99%，BCD-Tartaric acid hydrate

CM-M028小鼠食管平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL吲哚(>質量規(guī)格：>98%,BRIndole

LMAN2L Others Human 人 LMAN2L 人細胞裂解液 (陽性對照) 三(6,6,7,7,8,8,8-七氟-2,2-二甲基-3,5-辛二酮基)鐠(Ⅲ)(>97.0%(T))質量規(guī)格：>97.0%(T)Tris(6,6,7,7,8,8,8-heptafluoro-2,2-dimethyl-3,5-octanedionato)praseodymium(III)

球狀少突細胞培養(yǎng)基OsM(S)-(+)-1,1'-聯萘基-2,2'-雙1酸氫酯(>97.0%(T))質量規(guī)格：>97.0%(T)(S)-(+)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl Hydrogen Phosphate

RL95-2細胞，人細胞 小鼠細胞(分泌促生長激素分泌激素),AtT-20細胞 人星形膠質細胞HA(R,R)-(-)-2,3-丁二醇(>96.0%(GC))質量規(guī)格：>96.0%(GC)(R,R)-(-)-2,3-Butanediol
腎實質細胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)α-Apo-土霉素質量規(guī)格：美國進口α-Apo-oxytetracycline

CCL2 Others Mouse 小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 二水合土霉素質量規(guī)格：美國進口Oxytetracycline Dihydrate

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A44-差向土霉素質量規(guī)格：美國進口4-Epioxytetracycline

敘利亞倉鼠細胞系;Syrian Hamster AV12 細胞，MFC細胞 EPC細胞，大黃魚EPC細胞6α-羥基紫杉醇質量規(guī)格：美國進口6α-Hydroxy Paclitaxel

SV40T轉化的人胚腎細胞(亞系);293T/17α-腺苷質量規(guī)格：美國進口α-Adenosine
人間變性大細胞培養(yǎng)非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-乳清酸Orotic acid質量規(guī)格：>98%(T),BR

FGFR4 Others Human 人 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細胞裂解液 (陽性對照) 氟尼酸(標準品)Niflumic acid質量規(guī)格：>98%,標準品

小鼠B細胞雜交瘤細胞;SH3木聚糖XYLAN質量規(guī)格：>95%,來源于玉米芯,溶于水

ERBB3 Others Rhesus 恒河猴 HER3 / ErbB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 阿特拉津,莠去津Atrazine質量規(guī)格：>97%

caski 丁苯羥酸Bufexamac質量規(guī)格：>99%,BR