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人細胞 冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　人細胞
種屬:5637（HTB-9）

形態(tài):上皮樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；4.5g/LGlucose＋10mMHepes＋1mM丙酮酸鈉

傳代方法:1:4~1:8傳代；每周換液2~3次。

生長特性:貼壁生長

存儲條件:基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是人細胞 的相關熱銷產(chǎn)品：
中國倉鼠卵巢細胞;CHOUTP;5‘-三1酸尿苷三鈉UTP, Tri Salt質量規(guī)格：>98%,BR

SCARB2 Others Human 人 SCARB2 / LIMP2 / CD36L2 人細胞裂解液 (陽性對照) Fmoc-N'-甲基三苯甲基-L-賴氨酸Fmoc-Lys(Mtt)-OH質量規(guī)格：0.98

氣管上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)芴甲氧羰基-O-芐基-L-蘇氨酸Fmoc-Thr(Bzl)-OH質量規(guī)格：0.98

IFNA1 Others Rat 大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 人細胞裂解液 (陽性對照) N'-Fmoc-L-賴氨酸Fmoc-Lys-OH質量規(guī)格：>98%

大鼠尿道上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLFmoc-天門冬氨酸-β-芐酯Fmoc-L-aspartic acid β-benzyl ester質量規(guī)格：>98%
大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)蛋白激酶C（530-558）質量規(guī)格：>95%,BRProtein Kinase C (530-558)

HCT 116細胞，細胞 人細胞,Bel-7404細胞 CL-0016A549(人非小細胞細胞)5×106cells/瓶×2甲狀旁腺激素相關蛋白拼接同種型3（104-173），人質量規(guī)格：>95%,BRpTH-Related Protein Splice Isoform 3 (140-173) (human)

二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-甲狀旁腺激素（13-34），人質量規(guī)格：>95%,BRpTH (13-34) (human)

CSF1R Others Human 人 M-CSFR 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲狀旁腺激素（3-34），牛質量規(guī)格：>95%,BRpTH (3-34) (bovine)

小梁網(wǎng)細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)膽酸質量規(guī)格：≥98%,BR，無水Cholic acid
RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元 Rattus瓊脂糖凝膠6FF1克2～8℃

EPHA7 Others Mouse 小鼠 EPHA7 / EHK-3 人細胞裂解液 (陽性對照) 順-十輕-1-酚 CIS-DqCcxy7no-1-NcPHTHOL 99 36129-47-4

人B細胞瘤細胞;RAMOS1,2,3,4-環(huán)丁四羧二酐 Cyclobutcnq-1,2,3,4-tqtrcccrboxylic dicnhydridq 4412-87-6

GREM1 Others Mouse 小鼠 Gremlin 1 / GREM1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 麥芽浸膏湯shēng huà shì jì容量：100克

CL-0445Sp2/0-Ag14(小鼠細胞)5×106cells/瓶×2ConcanavalinA 25mg/100mg Amresco分裝
人細胞 F9 小鼠脫氫諾龍醋酸酯Dehydronandrolon質量規(guī)格：>96%

ERBB2 Others Rat 大鼠 ErbB2 / HER2 人細胞裂解液 (陽性對照) 延胡索酸/富馬酸/ 反丁1二酸Fumaric acid質量規(guī)格：AR,99%

小鼠結締組織L細胞株929*;L-929 [L929]甲磺酸達氟沙星Danofloxacin mesylate質量規(guī)格：>98%,BR

PLBD2 Others Human 人 PLBD2 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲磺酸達氟沙星(標準品)Danofloxacin mesylate質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

CM-M053小鼠卵巢上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL海藻酸鈣Calcium Alginate質量規(guī)格：AR,99%
收到人細胞 處理方法
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。