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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 凍存則用6mL凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為6支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。 |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX3449 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細(xì)胞形態(tài) | CM2-1培養(yǎng)液中,懸浮,淋巴母細(xì)胞樣,圓形 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 懸浮生長 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
人單核細(xì)胞形態(tài)來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 類型 | 佛號 |
人單核細(xì)胞形態(tài) | 懸浮生長 | CSX3449 |
資源名稱 人單核細(xì)胞
種屬:THP-1
類型:懸浮生長
形態(tài):CM2-1培養(yǎng)液中,懸浮,淋巴母細(xì)胞樣,圓形
分離基物:該細(xì)胞從一名1歲的患有急性單核細(xì)胞性的男孩的外周血中分離建立。
提供形式:復(fù)蘇形式:15ml離心管1支;或者凍存形式:2ml凍存管2支,干冰費(fèi)另計。
安全等級:1
模式菌株:未知
應(yīng)用領(lǐng)域:該細(xì)胞可以吞噬乳膠顆粒和激活的紅細(xì)胞,細(xì)胞膜和胞漿內(nèi)均沒有免疫球蛋白,表達(dá)C3R和FcR;可受佛波酯TPA誘導(dǎo)向單核系方向分化;可作為轉(zhuǎn)染宿主。
培養(yǎng)方法
傳代方法:將培養(yǎng)好的懸浮細(xì)胞輕輕吹打均勻,分配至3~6個新鮮培養(yǎng)液皿中,輕輕搖勻后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng);
生長條件:37℃,5%CO2,CM2-1培養(yǎng)液。CM2-1培養(yǎng)液:90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640:1640培養(yǎng)液,含谷氨酰胺。
生長特性:維持細(xì)胞濃度在2~4×105~8×105/ml,勿超過1×106/ml;2~3天換液1次。
存儲條件:凍存則用6mL凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為6支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
培養(yǎng)操作步驟:
人單核細(xì)胞形態(tài)1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品:
JEG-3(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 輪環(huán)藤寧四乙酸/1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙酸Tetraxetan/DOTA/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid質(zhì)量規(guī)格:>95%
人成細(xì)胞;Saos-2p, p’-DDE(標(biāo)準(zhǔn)品)p, p’-DDE質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
PPP3CA Others Human 人 PPP3CA / 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) p, p’-DDE標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%)p, p’-DDE solution質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=3%
CL-0429Romas(人瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2敵草腈(標(biāo)準(zhǔn)品)Dichlobenil質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
人絨毛膜內(nèi)皮細(xì)胞 人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-ESF-1細(xì)胞 Sol8(小鼠骨骼肌肌肉母細(xì)胞)乙二醇苯(標(biāo)準(zhǔn)品)Ethylene glycol monophenyl ether質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)
人急性母細(xì)胞性細(xì)胞;MOLT-4布地奈德(標(biāo)準(zhǔn)品)Budesonide質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 亞葉酸鈣Calcium Folinate質(zhì)量規(guī)格:>98%,水合物,BR
CM-H110人皮膚肥大細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL亞葉酸鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)Calcium Folinate質(zhì)量規(guī)格:>98%,含量測定
5-8F, 人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系 瘤,EL4IL-2細(xì)胞 PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤)喜樹堿Camptothecin質(zhì)量規(guī)格:> 99%,喜樹提取
小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11喜樹堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Camptothecin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
CCL18 Protein Human 重組人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 (His 標(biāo)簽)偏釩酸鈉shēng huà shì jì容量:0.25毫升
MCF-7(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,5-二溴 2,5-Dibromopyridinq 64-8-
貓腎細(xì)胞;CRFK正shēng huà shì jì容量:100克
人顱骨造骨細(xì)胞 (HCO) ( 5×105 )馬丁肉湯shēng huà shì jì容量:RT支
CL-0099HEC-1-A(人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×278-79-5, 99%Isoprene
人單核細(xì)胞形態(tài)HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 酞菁銅(II)(β-型)(>90.0%(T))Copper(II) Phthalocyanine (β-form)質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(T)
小鼠子細(xì)胞;U14三(1,3-二苯基-1,3-丙二酮基)(1,10-鄰二氮雜菲)銪(Ⅲ)(>95.0%(T))Tris(1,3-diphenyl-1,3-propanedionato)(1,10-phenanthroline)eur(III)質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)
METAP2 Others Mouse 小鼠 METAP2 / MAP2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-(2-苯并噻唑基)-7-(二乙氨基)(>98.0%(HPLC)(T))3-(2-Benzothiazolyl)-7-(diethylamino)coumarin質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
CM-M001小鼠肺微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 3-(2-苯并咪唑基)-7-(二乙氨基)(>98.0%(T))3-(2-Benzimidazolyl)-7-(diethylamino)coumarin質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
Hela, 人細(xì)胞系 小鼠成纖維細(xì)胞,3T3TK細(xì)胞 SPA-A1()4,4'-雙(5-甲基-2-苯并惡唑基)芪(升華提)(>96.0%(HPLC))4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene (purified by sublimation)質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(HPLC)
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線