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小鼠前細(xì)胞 來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

資源名稱　小鼠前細(xì)胞
種屬:MFC

類型:貼壁生長

形態(tài):CM2-1培養(yǎng)液中，貼壁，成纖維樣細(xì)胞，細(xì)長，交織成網(wǎng)狀

分離基物:1985年，由錢書森、高進(jìn)等建立；利用源自615小鼠前胃鱗癌移植瘤FC瘤組織，小塊法培養(yǎng)得到，已傳132代；615小鼠皮下移植100%成功

提供形式:復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶1瓶；或者凍存形式：2ml凍存管2支，干冰費(fèi)另計(jì)。

安全等級(jí):1

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

傳代方法:將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細(xì)胞剛有脫落時(shí)，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約0.5min取出。傳代用12mL CM2-1培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細(xì)胞，后可分3~6皿培養(yǎng)；

生長條件:37℃，5%CO2，CM2-1培養(yǎng)液。CM2-1培養(yǎng)液：90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640：1640培養(yǎng)液，含谷氨酰胺。

生長特性:對(duì)溫度敏感，易消化，注意消化時(shí)間

存儲(chǔ)條件:凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。

培養(yǎng)操作步驟：
小鼠前細(xì)胞 1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)苯并三氮唑鈉鹽（BTA-S）BTA-S質(zhì)量規(guī)格：≥40%澄清淡黃色液體

IL17RA Others Human 人 IL17RA / CD217 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 普羅布考Probucol質(zhì)量規(guī)格：>99%

人骨骼肌成肌細(xì)胞裂解物HSkMML普羅布考（標(biāo)準(zhǔn)品）Probucol質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

VTCN1 Others Human 人 B7-H4 / B7S1 / B7x 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) Ipatasertib(GDC0068)GDC-0068;RG7440質(zhì)量規(guī)格：>98%,高選擇性的pan-Akt抑制劑

人神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLL-天冬氨酸鎂L-Aspartic acid Mg salt質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
小梁網(wǎng)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)丙磺舒?；?/span>-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Probenecid Acyl β-D-Glucuronide

FCGR1 Others Rat 大鼠 CD64 / FCGR1A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 諾氟沙星-d5質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Norfloxacin-d5

NIH?3T3? 小鼠成纖維細(xì)胞4-含氧諾氟沙星質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口4-Oxo Norfloxacin

非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1N-羥基諾氟沙星質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口N-Hydroxy Norfloxacin

Hela, 人細(xì)胞系膽戊基碳酸酯質(zhì)量規(guī)格：Cholesterol Amyl Carbonate
白鰱尾鰭細(xì)胞系;SCF葡聚糖凝膠LH-20shēng huà shì jì容量：50毫克

T84細(xì)胞，人細(xì)胞 人色素瘤細(xì)胞,NW38細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0919茜速紅;茜速磺醋內(nèi);茜速S;茜速紅S;茜速胭脂紅;1,2-二羌基醌-3-磺醋內(nèi) clizcrin rqd;wo7ium clizcrin sulfonctq;9,10-Dixy7no-3,4-dixy7noxy-9,10-dioxo-2-cnthrccqnq sulfonic ccid wo7ium sclt;clizcrin sulfonic ccid wo7ium sclt;1,2-Dixy7noxycnthrcinoneonq-3-sulfonic ccid wo7ium sclt;clizcrin S;clizcrin ccrMi nq;C.I. 5800 130--3

HCC1937(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2環(huán)炳同 Cyclopropyl mqthyl kqtonq 762-43-2

ARSA Others Mouse 小鼠 ARSA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 錳鹽營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：RT10克

人Burkkit瘤細(xì)胞;DaudiCollagenTypeV 1g/10g原裝 Sigma C4387
小鼠前細(xì)胞 PLC/PRF/5(人亞力山大細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸右美托咪定Dexmedetomidine HCl質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BR

DLD-1(人腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0222SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系*);CHO-HCV-NS2地夫可特Deflazacort質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12D-(-)-泛酰內(nèi)酯 D-(-)-Pantolactone質(zhì)量規(guī)格：>99%

MCAM Others Mouse 小鼠 CD146 / MCAM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸丁咯地爾 Buflomedil HCl質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

C918 人眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞鹽酸丁咯地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Buflomedil HCl質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線