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培養(yǎng)操作步驟：
人細胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)說明書1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。 

資源名稱　人細胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)
種屬:NCI-H292

類型:貼壁生長

形態(tài):CM2-1培養(yǎng)液中，貼壁，上皮細胞樣，多角形，梭形

分離基物:該細胞株源自肺黏液上皮樣癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶；先用成份限定的培養(yǎng)基分離得到，然后換成含血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)。培養(yǎng)條件下該細胞保留了黏液上皮的特性，可從其超微結(jié)構(gòu)的表現(xiàn)和多種分化標記的表達而判斷。

提供形式:復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶1瓶；或者凍存形式：2ml凍存管2支，干冰費另計。

安全等級:1

模式菌株:未知

應(yīng)用領(lǐng)域:該細胞支持HBV的生長，左旋多巴脫羧酶陰性。該細胞可以作為篩選模型，將人類亞基因組片段轉(zhuǎn)染入細胞來研究HBV及其自身基因在和發(fā)生中的作用。該細胞角蛋白、波形蛋白、黏液洋紅染色陽線，但神經(jīng)絲三聯(lián)蛋白陰性。

培養(yǎng)方法

傳代方法:將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約2min取出。傳代用12mL CM2-1培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細胞，后可分3~6皿培養(yǎng)；

生長條件:37℃，5%CO2，CM2-1培養(yǎng)液。CM2-1培養(yǎng)液：90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640：1640培養(yǎng)基，含谷氨酰胺。

存儲條件:凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
CTSE Others Mouse 小鼠 CTSE / Cathepsin-E 人細胞裂解液 (陽性對照) 常山酮 Halofuginone質(zhì)量規(guī)格：提取含量5%以上

人間充質(zhì)干細胞-*RNAHMSC-hp miRNA5 μg戈米辛D(標準品)Gomisin D質(zhì)量規(guī)格：＞98.0% (LC&T)，標準品

LOXL2 Others Human 人 LOXL2 / Lysyl oxidase homolog 2 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-甲基1-Methyl Xanthine質(zhì)量規(guī)格：>98%

OVCaR-3 人細胞6-羧基-X-羅丹明6-Carboxy-X- rhodamine; 6-ROX 質(zhì)量規(guī)格：>95%

MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元西侖吉肽Cilengitide,EMD121974,NSC 707544質(zhì)量規(guī)格：>97%,integrin抑制劑
小鼠樹突狀細胞細胞;DCS胭脂紅（標準品）質(zhì)量規(guī)格：檢查Carmine

人胚胎絨毛細胞(HAF)(1×106 )赤蘚紅（標準品）質(zhì)量規(guī)格：檢查Acid Red 51

CM-R112大鼠小腦顆粒細胞完全培養(yǎng)基100mL酸性紅 73（標準品）質(zhì)量規(guī)格：檢查Acid Red 73

小鼠癌細胞;CCC-Ca761-03 小鼠外周血白細胞完全培養(yǎng)基 100mL（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Lauric acid

人少突膠質(zhì)細胞 Human結(jié)晶質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRCrystalline
MM, 小鼠小膠質(zhì)細胞AGAROSESFR超高分辨率瓊脂糖生物技術(shù)級25G

MDA-MB-157細胞，癌細胞 人胎盤絨膜癌細胞,BeWo細胞 人肺動脈內(nèi)皮細胞RNAHPASMC miRNA5 μg硼完二流迷絡(luò)合物 Borcnq-Mqthyl sulfidq coMplqx ccroSqcl 139-87-0

恒河猴腎細胞;MMK2Bismuth鉍20毫升FGC，60-80目

EPHB6 Others Human 人 EphB6 / EPHB6 人細胞裂解液 (陽性對照) MALTEXTRACT麥牙提取物細菌學(xué)級500GCOLD

人肺間充質(zhì)干細胞總RNAHPMSC NA(N-羥基琥珀生物素)
人細胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)說明書人氣管平滑肌細胞 (HTSMC)( 5×105 ) MLF, 小鼠成纖維細胞 Mouse異蒽酮紫Isoviolanthrone質(zhì)量規(guī)格：

中國倉鼠卵巢細胞(亞系*);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr2-甲基環(huán)戊[I]菲(>97.0%(GC))2-Methylcyclopenta[l]phenanthrene質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)

GPHA2 Others Human 人 GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 人細胞裂解液 (陽性對照) 萘[2,3-a]芘(>98.0%(GC))Naphtho[2,3-a]pyrene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

CL-0069COS-7(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細胞)5×106cells/瓶×22-氯吩噻嗪(>98.0%(GC))2-Chlorophenothiazine質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

HL-60細胞，早幼粒急性細胞系 人T細胞瘤,Hurt-78細胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-C22-氯-4,6-二苯基-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))2-Chloro-4,6-diphenyl-1,3,5-triazine質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
人細胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)說明書來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。