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人皮脂腺細(xì)胞形態(tài)冷凍保存細(xì)胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟：

資源名稱　人皮脂腺細(xì)胞形態(tài)
種屬:SZ95

形態(tài):細(xì)胞為不規(guī)則形狀或梭形，部分增殖中細(xì)胞偏圓形及橢圓形

提供形式:T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶/凍存管

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%高糖DMEM（含4mM L-谷氨酰胺、丙酮酸鈉）+10%FBS

生長條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

生長特性:貼壁生長

存儲條件:90%FBS+10%DMSO 液氮
細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過程：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是人皮脂腺細(xì)胞形態(tài)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
MKN-45細(xì)胞，人低分化細(xì)胞 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,BE(2)C細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2氘代DMSO-D6(10 g )Dimethyl Sulfoxide-D6質(zhì)量規(guī)格：D,99.9%

CRFK(貓腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2氘代DMSO-D6(50 g )Dimethyl Sulfoxide-D6質(zhì)量規(guī)格：D,99.8%+TMS 0.03%

CA10 Others Human 人 CA10 / CARPX 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氘代DMSO-D6(50 g )Dimethyl Sulfoxide-D6質(zhì)量規(guī)格：D,99.9%

人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN氘代DMSO-D6(100g )Dimethyl Sulfoxide-D6質(zhì)量規(guī)格：D,99.8%

NRN1 Others Human 人 NRN1 / Neuritin 1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙酸銨(色譜級)Ammonium acetate質(zhì)量規(guī)格：for HPLC,≥99.0%
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系*);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)乙酰輔酶A鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：≥93%,美國進(jìn)口Acetyl coenzyme A  salt 

CD63 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 肌苷酸二鈉質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRDi 5'-Inosinate

粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)環(huán)索奈德質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRCiclesonide

MEF-7/Adr細(xì)胞，腺癌阿霉素耐藥株 人細(xì)胞,HOC1細(xì)胞 人成纖維細(xì)胞裂解物HMFL環(huán)索奈德(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Ciclesonide

恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2四溴雙酚A雙(2-羥乙基)(>93.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>93.0%(GC)Tetrabromobisphenol A Bis(2-hydroxyethyl) Ether
SD大鼠脂肪間質(zhì)干細(xì)胞 SD rat adipose mesenchymal stem cells5-尿苷三嶙酸四鈉鹽25克

BT-325細(xì)胞，人神經(jīng)細(xì)胞 空腸彎曲菌 人胚皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-ESF-1α-基-4-羥基肉桂酸 α-Cyano-4-hydroxycinnamic acid,≥98% 28166-41-8 1G 通用試劑

SNU-5(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2L(-)-巖藻糖 L-FUCOSq 438-80-4

Hep G2(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0442SK-NEP-1(人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 人胚胎肌肉組織來源細(xì)胞;CCC-HSM-2麗春紅S100克

人細(xì)胞;SF1269001-22-3β-葡萄糖苷酶　杏仁 (+4℃)BETA-GLUCOSIDASE
人皮脂腺細(xì)胞形態(tài)CHOdhfr細(xì)胞，二氫葉酸缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞 人癌細(xì)胞系,1590細(xì)胞 人星形膠質(zhì)細(xì)胞裂解物HAL正(Standard for GC,>99.5%(GC))1-Hexanol質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99.5%(GC)

猴腎細(xì)胞;vero IgRCD4-正(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.8%(GC))1-Hexanol質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.8%(GC)

IL12A Others Human 人 IL12A / NKSF1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 十六醇(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))1-Hexadecanol質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)

豬腎細(xì)胞;LLC-PK11,6-己二醇(standard for GC)1,6-Hexanediol質(zhì)量規(guī)格：standard for GC

ERBB4 Others Rat 大鼠 HER4 / ErbB4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 十七烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))Heptadecane質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)
收到人皮脂腺細(xì)胞形態(tài)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。