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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 莼試 |
貨號(hào) | CS-E10627 |
用途 | 僅用于科研 |
檢測方法 | 詳見說明書 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
適應(yīng)物種 | 詳見說明書 |
檢測限 | 0.5pg/mL~16pg/mL |
數(shù)量 | 29 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
標(biāo)記物 | 詳見說明書 |
純度 | 98% |
樣本 | endotoxin |
應(yīng)用 | 詳見說明書 |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司常年代理eBioscience品牌、Mercodia品牌、Panbio品牌、Alpco品牌、CST品牌、IBL-America品牌、AbFrontier品牌、Calbiotech品牌、Anogen品牌、Ani Biotech品牌、AAT Bioquest品牌、Jaica品牌等elisa試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 檢測范圍 |
人內(nèi)毒素ELISA試劑盒 | endotoxin | 0.5pg/mL~16pg/mL |
自備物品:
酶標(biāo)儀(450nm)
高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
37℃恒溫箱
自備的設(shè)備及試劑:
1. 450±10nm濾光片的酶標(biāo)儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱)
2. 單道或多道微量加液器及吸頭
3. 稀釋樣品的EP管
4. 蒸餾水或去離子水
5. 吸水紙
6. 盛放洗液的容器
試劑盒性能:
人內(nèi)毒素ELISA試劑盒 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
靈敏度:*檢測濃度小于0.1 pg/mL。
特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10%、板間變異系數(shù)小于15%。
貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
有效期:6個(gè)月
雙抗體夾心法(檢測未知抗原) | 間接法(檢測未知抗體) |
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。 2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。 3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。 4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。 | 1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。 2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照) 3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)*抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,*一遍用DDW洗滌。 4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。 |
樣品收集、處理及保存方法:
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
大鼠甲狀腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL雄1二酮4-Androstene-3,17-dione質(zhì)量規(guī)格:≥99%,BR
AML-12小鼠正常肝細(xì)胞 Normal liver cells of AML-12 mice DMEM+10%FBS雄1二酮(標(biāo)準(zhǔn)品)4-Androstene-3,17-dione質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%
EGF Protein Mouse 重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)赤芝酸A Lucidenic acid A質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%
SMC-1(人胸膜瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 胃黏膜上皮Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)維生素E琥珀酸酯;D-α-生育酚琥珀酸酯Vitamin E succinate質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞;BV2伊沙匹隆Ixabepilone (Azaepothilone B; BMS 247550)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
MEG-01 人成巨核細(xì)胞細(xì)胞1酸長春瑞濱水合鹽Vinorelbine ditartrate salt hydrate質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
MSTO-211H人細(xì)胞株 Human lung cancer cell line MSTO-211H RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSN-甲基糠酰羥1酸(>99.0%(HPLC))N-Methylfurohydroxamic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(HPLC)
MIF Protein Human 重組人 MIF / GLIF 蛋白 (His 標(biāo)簽)2,2'-二辛可寧酸二鉀鹽水合物(>98.0%(HPLC))2,2'-Bicinchoninic Acid Dipotassium Salt Hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
人胚;WI-38 [WI38] 人成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氯冉酸(>98.0%(HPLC)(T))Chloranilic Acid質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
人癌細(xì)胞;SK-BR-3焦棓酚紅Pyrogallol Red質(zhì)量規(guī)格:螯合劑
人癌細(xì)胞;MDA-MB-231佐米曲普坦質(zhì)量規(guī)格:>99%Zolmitriptan
CPB1 Others Mouse 小鼠 CPB1 / PCPB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 胸腺肽alpha 1質(zhì)量規(guī)格:BR,進(jìn)分Thymosin alpha 1 Acetate
CM-H101新生兒細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL苊1(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Acenaphthylene
COLEC10 Others Mouse 小鼠 COLEC10 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 二苯胍(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品(for titrimetry),≥99.5%(HPLC)Diphenyl guanidine
人氣管上皮細(xì)胞HTEpiC13-乙?;?/span>-9-羥基巴卡丁III(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%13-Acetyl-9-dihydrobaccatin III
人內(nèi)毒素ELISA試劑盒EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0902 胎兒細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL外消旋鹽酸舍曲林-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口rac Sertraline-d3
上皮細(xì)胞培養(yǎng)基-2EpiCM-2-prf(1S,4R)-N-去甲基鹽酸舍曲林質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口(1S,4R)-N-Desmethyl Sertraline
CDH2 Others Human 人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (1R,4S)-N-去甲基鹽酸舍曲林質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口(1R,4S)-N-Desmethyl Sertraline
人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞;293 Ad5(1S,4S)-N-去甲基鹽酸舍曲林質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口(1S,4S)-N-Desmethyl Sertraline
HNE3細(xì)胞,人細(xì)胞 小鼠瘤細(xì)胞,EL4細(xì)胞 CM-H022人成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLN-去甲基利福平質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口N-Demethyl Rifampin
操作流程如下:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl?!?/span>
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl?!?/span>
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)?!?/span>
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl?!?/span>
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min?!?/span>
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)?!?/span>
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。