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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CS-E10648 |
用途 | 僅用于科研 |
檢測方法 | 詳見說明書 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
適應(yīng)物種 | 詳見說明書 |
檢測限 | 2.5mg/L~80mg/L |
數(shù)量 | 50 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
標(biāo)記物 | 詳見說明書 |
純度 | 98% |
樣本 | urinary protein |
應(yīng)用 | 詳見說明書 |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司常年代理eBioscience品牌、Mercodia品牌、Panbio品牌、Alpco品牌、CST品牌、IBL-America品牌、AbFrontier品牌、Calbiotech品牌、Anogen品牌、Ani Biotech品牌、AAT Bioquest品牌、Jaica品牌等elisa試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 檢測范圍 |
人ELISA試劑盒 | urinary protein | 2.5mg/L~80mg/L |
自備物品:
酶標(biāo)儀(450nm)
高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
37℃恒溫箱
自備的設(shè)備及試劑:
1. 450±10nm濾光片的酶標(biāo)儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱)
2. 單道或多道微量加液器及吸頭
3. 稀釋樣品的EP管
4. 蒸餾水或去離子水
5. 吸水紙
6. 盛放洗液的容器
試劑盒性能:
人ELISA試劑盒 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
靈敏度:*檢測濃度小于0.1 pg/mL。
特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10%、板間變異系數(shù)小于15%。
貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
有效期:6個月
雙抗體夾心法(檢測未知抗原) | 間接法(檢測未知抗體) |
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。 2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。 3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。 4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。 | 1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。 2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照) 3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)*抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,*一遍用DDW洗滌。 4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。 |
樣品收集、處理及保存方法:
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
RPE Others Human 人 RPE / RPE2-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 頭孢西丁鈉Cefoxitin 質(zhì)量規(guī)格:>90.1%,USP
小鼠瘤株;S180頭孢西丁鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Cefoxitin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人膠質(zhì)細(xì)胞(少突細(xì)胞)(HO) (1×106 )纈沙坦Valsartan 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP30
原代細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml纈沙坦(標(biāo)準(zhǔn)品)Valsartan 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人巨細(xì)胞細(xì)胞株;Mo7e 大鼠卵巢上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL格列吡嗪 Glipizide質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
EPHA7 Others Mouse 小鼠 EPHA7 / EHK-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DL-蘇氨酸DL-Threonine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
人B細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOSL-腺苷L-Adenosine 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
GREM1 Others Mouse 小鼠 Gremlin 1 / GREM1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 腺苷-2'-單1酸鹽Adenosine-2'-monophosphate 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
CL-0445Sp2/0-Ag14(小鼠細(xì)胞)5×106cells/瓶×2腺苷 3'-單1酸鹽水合物Adenosine 3'-Monophosphate Hydrate質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 R3細(xì)胞 C2C12(人肌肉成纖維細(xì)胞瘤)腺苷胺類Adenosine Amine Congener質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
抗霉菌溶液ABAMS氨來呫諾;氨來諾質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRAmlexanox
大額牛肺細(xì)胞;BFR-L1 中國倉鼠卵巢細(xì)胞,CHO細(xì)胞 Lncap(細(xì)胞)蘿酸;D-地衣酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品(+)-Usnic acid
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KM933蘿酸;D-地衣酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR(+)-Usnic acid
SERPINE1 Others Human 人 PAI-1 / SerpinE1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 茴香霉素質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRAnisomycin, from Streptomyces griseolus
CL-0040BT-474(人導(dǎo)管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2胰多肽,大鼠質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRPancreatic Polypeptide, rat
人ELISA試劑盒GC-1, 鼠精原細(xì)胞 swiss鼠胚胎成纖維細(xì)胞,3T3 swiss細(xì)胞 NCL-H548(人細(xì)胞)25克
人細(xì)胞;MKN-45基炳1醋-2-(二安基)酯;基炳1醋 N,N-二安基酯 2-(DiMqthylcMino)qthyl Mqthccrylctq; 867-47-
CTLA4 Others Human 人 CTLA4 / CD152 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 嶙酸100克
人臍內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC肌動蛋白(廣譜)100克RT
F9 Others Human 人 F9 / FIX / Factor IX 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 52130-17-33-基-2-甲基本3-Amino-2-metxylbenzoic acid
操作流程如下:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl?!?/span>
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl?!?/span>
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)?!?/span>
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl?!?/span>
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min?!?/span>
(9)洗板,同(4)?!?/span>
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min?!?/span>
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。