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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 莼試 |
| 貨號(hào) | CS-E10644 |
| 用途 | 僅用于科研 |
| 檢測(cè)方法 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
| 適應(yīng)物種 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
| 檢測(cè)限 | 0.25ng/mL~8ng/mL |
| 數(shù)量 | 46 |
| 包裝規(guī)格 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
| 標(biāo)記物 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
| 純度 | 98% |
| 樣本 | focal adhesion kinase |
| 應(yīng)用 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
公司常年代理eBioscience品牌、Mercodia品牌、Panbio品牌、Alpco品牌、CST品牌、IBL-America品牌、AbFrontier品牌、Calbiotech品牌、Anogen品牌、Ani Biotech品牌、AAT Bioquest品牌、Jaica品牌等elisa試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 檢測(cè)范圍 |
人黏著斑激酶ELISA試劑盒 | focal adhesion kinase | 0.25ng/mL~8ng/mL |
自備物品：
酶標(biāo)儀（450nm）
高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
37℃恒溫箱
自備的設(shè)備及試劑：
1. 450±10nm濾光片的酶標(biāo)儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱)
2. 單道或多道微量加液器及吸頭
3. 稀釋樣品的EP管
4. 蒸餾水或去離子水
5. 吸水紙
6. 盛放洗液的容器
試劑盒性能：
人黏著斑激酶ELISA試劑盒 準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。
靈敏度：*檢測(cè)濃度小于0.1 pg/mL。
特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10%、板間變異系數(shù)小于15%。
貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
有效期：6個(gè)月
| 雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原) | 間接法(檢測(cè)未知抗體) |
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過(guò)夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。 2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。 3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。 4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。 5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。 | 1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃過(guò)夜。次日洗滌3次。 2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照) 3、加酶標(biāo)抗體：于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)*抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,*一遍用DDW洗滌。 4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。 5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。 |
樣品收集、處理及保存方法：
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞;RAW 264.7 [RAW264.7 小鼠管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL四苯硼鈉 tetraphenylboron質(zhì)量規(guī)格：AR
人平滑肌細(xì)胞 Human磺基水楊酸鈉 sulfosalicylate質(zhì)量規(guī)格：AR
LYPD3 Others Mouse 小鼠 LYPD3 / MIG-C4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 亞硝基紅鹽Nitroso R Salt質(zhì)量規(guī)格：AR
小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]玫瑰紅酸鈉Rhodizonic acid salt質(zhì)量規(guī)格：AR
EPHA2 Others Human 人 EphA2 (aa 585-976) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 靛藍(lán)二磺酸鈉Indigo carmine質(zhì)量規(guī)格：AR
HT-29人細(xì)胞 HT-29 human colon cancer cells McCoy's *+10%FBS克羅米通Crotamiton 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR
TNFSF12 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 人 TNFSF12 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)L-組氨酸L-Histidine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
人虹狀體上皮細(xì)胞 (HIPEpiC)( 5×105 ) HUM, 正常人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 HumanL-丙氨酸L-Alanine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
人T瘤細(xì)胞Jurkat亞系;Jurkat77L-酪氨酸L-Tyrosine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
STC2 Others Human 人 STC2 / Stanniocalcin 2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-酪氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)L-Tyrosine質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前細(xì)胞;MFC-GFP大觀霉素（標(biāo)準(zhǔn)品）spectinomycin質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定
ADAM12 Others Human 人 ADAM12 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 5-甲基四氫葉酸5-MTHF；5-Methyltetrahydrofolic Acid Calcium Salt Trihydrate質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)口，鈣鹽三水合物
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-8 [HRT-18]吉它霉素（標(biāo)準(zhǔn)品）Kitasamycin質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定
FAM3C Others Human 人 FAM3C / ILEI 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 交沙霉素（標(biāo)準(zhǔn)品）josamycin質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定
CM-R018大鼠頜下腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL醋酸麥迪霉素（標(biāo)準(zhǔn)品）Midecamycin Acetate質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定
人黏著斑激酶ELISA試劑盒腎系膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)FAD-Na2黃素腺嘌呤二核甙酸二鈉100u超，98%，二水物
Kasumi-1細(xì)胞，人急性成髓細(xì)胞 615小鼠T細(xì)胞性瘤株,L7912細(xì)胞 超氧化物歧化酶分析試劑盒SOD3,3-二己基氧雜羰花青典化物 98% 3,3'-DIHqXYLOXcCcRBOCYcNINq IODIDq 2313/8/4
NCI-H524(人非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2D-pxenylglycine本甘酸5克BR，99%
C6(大鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-00063T3-L1(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-Swiss albinoN-P-K(7-6-19)花寶1號(hào)1KU超，99%
牛腎細(xì)胞;MDBK;γ-丁內(nèi)酯;4-羥基內(nèi)酯1,4-Butyrolactone;1,4-Butanolide;1,2-Butanolide;γ-xy7noxybutyric acid lactone;4-xy7noxybutyric acid-γ-lactone
操作流程如下：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl?！?/span>
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min?！?/span>
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl?！?/span>
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min?！?/span>
（9）洗板，同（4）?！?/span>
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min?！?/span>
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)?！?/span>
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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