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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CS-E10734 |
用途 | 僅用于科研 |
檢測方法 | 詳見說明書 |
CAS編號 | |
保質期 | 詳見說明書 |
適應物種 | 詳見說明書 |
檢測限 | 0.5ng/mL~16ng/mL |
數(shù)量 | 54 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
標記物 | 詳見說明書 |
純度 | 98% |
樣本 | Heat Shock 70kDa Protein 12B |
應用 | 詳見說明書 |
是否進口 | 是 |
公司常年代理eBioscience品牌、Mercodia品牌、Panbio品牌、Alpco品牌、CST品牌、IBL-America品牌、AbFrontier品牌、Calbiotech品牌、Anogen品牌、Ani Biotech品牌、AAT Bioquest品牌、Jaica品牌等elisa試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 檢測范圍 |
人熱休克70kDa蛋白12BELISA試劑盒 | Heat Shock 70kDa Protein 12B | 0.5ng/mL~16ng/mL |
自備物品:
酶標儀(450nm)
高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
37℃恒溫箱
自備的設備及試劑:
1. 450±10nm濾光片的酶標儀(建議儀器使用前提前預熱)
2. 單道或多道微量加液器及吸頭
3. 稀釋樣品的EP管
4. 蒸餾水或去離子水
5. 吸水紙
6. 盛放洗液的容器
試劑盒性能:
人熱休克70kDa蛋白12BELISA試劑盒 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值,大于等于0.9900。
靈敏度:*檢測濃度小于0.1 pg/mL。
特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
重復性:板內變異系數(shù)小于10%、板間變異系數(shù)小于15%。
貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
有效期:6個月
雙抗體夾心法(檢測未知抗原) | 間接法(檢測未知抗體) |
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。 2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。 3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。 4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。 | 1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。 2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照) 3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標*抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,*一遍用DDW洗滌。 4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。 |
樣品收集、處理及保存方法:
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
mEPC, 小鼠內皮祖細胞-骨髓 小鼠精母細胞,GC-2spd細胞 Mv.1.Lu(NBL-7)(貂肺上皮細胞)無水1酸二氫鈉(標準品) Dihydrogen Phosphate Anhydrous質量規(guī)格:供檢查用
人類原巨核細胞型細胞;UT-7長春西?。藴势罚?/span>Vinpocetine質量規(guī)格:含量測定
CD200R4 Others Mouse 小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 人細胞裂解液 (陽性對照) 枸櫞酸鉍雷尼替?。藴势罚?/span>Ranitidine bismuth 質量規(guī)格:供檢查用
小鼠T瘤細胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA丹曲林鈉(標準品)Dantrolene hemiheptahydrate質量規(guī)格:含量測定
人少突膠質前體細胞(HOPC-os)(懸浮生長)呱西替柳(標準品)Guacetisal質量規(guī)格:含量測定
SUNE-1細胞,低分化細胞系 鼠色素瘤細胞系,B16-Fo細胞 CM-H031人食管上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL多菌靈標準溶液(100μg/ml,u=3%)Carbendazim solution質量規(guī)格:100μg/ml,u=3%
NR8383(大鼠肺泡巨噬細胞) 5×106cells/瓶×2Cbz-L-蘇氨酸芐酯N-Cbz-L-threonine Benzyl Ester質量規(guī)格:0.98
Promocell C-26140 Placeal Epithelial CellGrowth Medium KIT, 胎盤上皮細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml(+)-2-甲基-L-絲氨酸(+)-2-Methyl-L-serine質量規(guī)格:0.99
腦微內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)3,3-二苯基-L-丙氨酸3,3-Diphenyl-L-alanine質量規(guī)格:0.98
HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) α-甲基-L-苯丙氨酸α-Methyl-L-phenylalanine質量規(guī)格:98%,BR,一水物
TNFRSF10D Others Human 人 AILR4 / TNFRSF10D / DCR2 / CD264 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-溴甲基-6,7-二甲氧基(>98.0%(HPLC))質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)4-Bromomethyl-6,7-dimethoxycoumarin
CL-0247ZR-75-1(人癌細胞)5×106cells/瓶×2 DBD-CO-Hz [=4-(N,N-二甲基氨基磺酰)-7-(N-肼基羰甲基-N-甲基)氨基-2,1,3-苯并惡二唑](>98.0%(HPLC))
NRG1 Others Human 人 NRG1-alpha (ECD) 人細胞裂解液 (陽性對照) 質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)DBD-CO-Hz [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(N-hydrazinocarbonylmethyl-N-methyl)amino-2,1,3-benzoxadiazole]
小鼠甲狀腺上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLNBD-CO-Hz [=4-(N-肼羰甲基-N-甲氨基)-7-硝基-2,1,3-苯并惡二唑](>95.0%(HPLC))質量規(guī)格:>95.0%(HPLC)NBD-CO-Hz [=4-(N-Hydrazinocarbonylmethyl-N-methylamino)-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole]
Sf9昆蟲卵巢細胞 Sf9 insect ovarian cells GPM-115無血清無蛋白昆蟲細胞懸浮培養(yǎng)基(金普諾安 Cat#GPM001L01)BOC-硝基-L-精氨酸質量規(guī)格:>99%,BRBoc-Arg(NO2)-OH
人熱休克70kDa蛋白12BELISA試劑盒人食道平滑肌細胞cDNAHESMC cDNA9-去氧-9a-氮雜-同型紅霉素A 去甲阿奇霉素質量規(guī)格:美國進口9-Deoxo-9a-aza-9a-homo Erythromycin A Desmethyl Azithromycin
COLEC10 Others Cynomolgus 食蟹猴 COLEC10 人細胞裂解液 (陽性對照) 阿奇霉素質量規(guī)格:美國進口Azithromycin
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B1阿奇霉素-d3質量規(guī)格:美國進口Azithromycin-d3
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B2 胰蛋白酶-EDTA(含100mL酶解緩沖液) 10mLΔ6,7-巴卡丁 III質量規(guī)格:美國進口Δ6,7-Baccatin III
MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細胞 Human(R)-奧美拉唑鈉鹽質量規(guī)格:美國進口(R)-Omeprazole Salt
操作流程如下:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl?!?/span>
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl?!?/span>
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)?!?/span>
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min?!?/span>
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應?!?/span>
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。