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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 莼試 |
貨號(hào) | CS-E10760 |
用途 | 僅用于科研 |
檢測(cè)方法 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
適應(yīng)物種 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
檢測(cè)限 | 75pg/mL~2400pg/mL |
數(shù)量 | 39 |
包裝規(guī)格 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
標(biāo)記物 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
純度 | 98% |
樣本 | Milk Fat Globule EGF Factor 8 |
應(yīng)用 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司常年代理eBioscience品牌、Mercodia品牌、Panbio品牌、Alpco品牌、CST品牌、IBL-America品牌、AbFrontier品牌、Calbiotech品牌、Anogen品牌、Ani Biotech品牌、AAT Bioquest品牌、Jaica品牌等elisa試劑盒。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 檢測(cè)范圍 |
人乳脂球表皮生長(zhǎng)因子8ELISA試劑盒 | Milk Fat Globule EGF Factor 8 | 75pg/mL~2400pg/mL |
自備物品:
酶標(biāo)儀(450nm)
高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
37℃恒溫箱
自備的設(shè)備及試劑:
1. 450±10nm濾光片的酶標(biāo)儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱)
2. 單道或多道微量加液器及吸頭
3. 稀釋樣品的EP管
4. 蒸餾水或去離子水
5. 吸水紙
6. 盛放洗液的容器
試劑盒性能:
人乳脂球表皮生長(zhǎng)因子8ELISA試劑盒 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
靈敏度:*檢測(cè)濃度小于0.1 pg/mL。
特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。
重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10%、板間變異系數(shù)小于15%。
貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
有效期:6個(gè)月
雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原) | 間接法(檢測(cè)未知抗體) |
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。 2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。 3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。 4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。 | 1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日洗滌3次。 2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照) 3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)*抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,*一遍用DDW洗滌。 4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。 |
樣品收集、處理及保存方法:
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
IL13RA2 Others Rat 大鼠 IL13RA2 / IL13R 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 四氫甲基嘧啶羧酸(>Ectoine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人視網(wǎng)膜muller細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氧化鎂碳酸鈉合劑Eschka's mixture質(zhì)量規(guī)格:BC
GH3細(xì)胞,大鼠埀體瘤細(xì)胞 5637(人細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞;Vero E6乙酯(>Ethyl dodeconoate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
EFNA1 Protein Human 重組人 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)乙基曙紅(>95%,BS)Ethyl eosin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BS
HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 肝竇內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)沒(méi)食子酸乙酯Ethyl gallate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 甲基倍他環(huán)糊精,2,6-二甲基-β-環(huán)糊精Me-β-CD質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IMR-32 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞埃博霉素B;帕土匹龍Epothilone B(EPO906, Patupilone) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CEM/C1人急性細(xì)胞細(xì)胞 CEM/C1 human acute lymphoblastic leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSA 83-01;A83-01A8301質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
VEGFA Protein Mouse 重組小鼠 VEGFA / VEGF164 蛋白Amresco 進(jìn)分瓊脂粉Agar質(zhì)量規(guī)格:BR,進(jìn)分
小鼠垂體細(xì)胞(MPC)(5×105) 5637, 人細(xì)胞 Human氟伏沙明Fluvoxamine質(zhì)量規(guī)格:>98%,油狀
SPN Others Mouse 小鼠 SPN / CD43 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 布地奈德-d8Budesonide-d8質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
EJ 人細(xì)胞6α-羥基布地奈德6α-Hydroxy Budesonide質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
SW1116人腺癌細(xì)胞 SW1116 human colon adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS6β-羥基布地奈德6β-Hydroxy Budesonide質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
CD70 Protein Rat 重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)亞葉酸鈣水合物Folinic acid calcium salt hydrate質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
人脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟(HPA-v)(1×106 ) MDA-MB-231(ATCC來(lái)源), 人癌細(xì)胞 Human喜樹(shù)堿鈉鹽 Camptothecin質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
人乳脂球表皮生長(zhǎng)因子8ELISA試劑盒REG1B Others Human 人 REG1B / PSPS2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 溴百里酚藍(lán)鈉鹽25克
貓星形腦膠質(zhì)細(xì)胞;PG-4(S+L-)2,4-二叔丁基本酚,99%A 2,4-Di-tqrt-butylphqnol 96-76-4
CDCP1 Others Human 人 CDCP1 / CD318 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 粘蛋白胭脂紅5KU
人平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL四本硼鉀100毫克保存:-20℃
A-431細(xì)胞,人表皮癌細(xì)胞 嗜血桿菌 BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.11975-50-42-甲基-3-硝基本2-metxyl-3-nitnobenzoic acid
操作流程如下:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl?!?/span>
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl?!?/span>
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min?!?/span>
(6)洗板,同(4)?!?/span>
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl?!?/span>
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)?!?/span>
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)?!?/span>
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。