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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 莼試 |
| 貨號(hào) | CS-E10847 |
| 用途 | 僅用于科研 |
| 檢測方法 | 詳見說明書 |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 適應(yīng)物種 | 詳見說明書 |
| 檢測限 | 5pg/mL~160pg/mL |
| 數(shù)量 | 44 |
| 包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
| 標(biāo)記物 | 詳見說明書 |
| 純度 | 98% |
| 樣本 | mitogen activited protein kinase 3 |
| 應(yīng)用 | 詳見說明書 |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
公司常年代理eBioscience品牌、Mercodia品牌、Panbio品牌、Alpco品牌、CST品牌、IBL-America品牌、AbFrontier品牌、Calbiotech品牌、Anogen品牌、Ani Biotech品牌、AAT Bioquest品牌、Jaica品牌等elisa試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 檢測范圍 |
人絲裂原活化蛋白激酶3ELISA試劑盒 | mitogen activited protein kinase 3 | 5pg/mL~160pg/mL |
自備物品：
酶標(biāo)儀（450nm）
高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
37℃恒溫箱
自備的設(shè)備及試劑：
1. 450±10nm濾光片的酶標(biāo)儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱)
2. 單道或多道微量加液器及吸頭
3. 稀釋樣品的EP管
4. 蒸餾水或去離子水
5. 吸水紙
6. 盛放洗液的容器
試劑盒性能：
人絲裂原活化蛋白激酶3ELISA試劑盒 準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。
靈敏度：*檢測濃度小于0.1 pg/mL。
特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10%、板間變異系數(shù)小于15%。
貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
有效期：6個(gè)月
| 雙抗體夾心法(檢測未知抗原) | 間接法(檢測未知抗體) |
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。 2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。 3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。 4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。 5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。 | 1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。 2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照) 3、加酶標(biāo)抗體：于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)*抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,*一遍用DDW洗滌。 4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。 5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。 |
樣品收集、處理及保存方法：
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
SW579(人甲狀腺鱗癌細(xì)胞 ) 5×106cells/瓶×2辛弗林Synephrine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
HSaVEC-c 人隱內(nèi)皮細(xì)胞(HSaVEC) 500,000cells 成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)辛弗林鹽酸鹽Synephrine HCl質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
腎小管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)三尖杉寧堿(標(biāo)準(zhǔn)品）Cephalomannine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
GHR Others Rat 大鼠 GHR / Growth Hormone Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 吉莫斯特;吉美嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)Gimeracil質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
NRL1 化大家鼠肺成纖維樣細(xì)胞吉莫斯特;吉美嘧啶Gimeracil質(zhì)量規(guī)格：>98%,二氫嘧啶脫氫酶(DPD)抑制劑
CXCL16 Protein Canine 重組狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)2,7-二溴-9,9-二己基芴(>98.0%(HPLC))2,7-Dibromo-9,9-dihexylfluorene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)
MGC80-3(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FGFR2 / CD332 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2,7-二溴-9,9-二正辛基芴(>98.0%(HPLC))2,7-Dibromo-9,9-di-n-octylfluorene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)
黃牛皮膚細(xì)胞;BTA-S24,5-亞乙基二硫代-1,3-二硫醇-2-硫酮(>98.0%(GC))4,5-Ethylenedithio-1,3-dithiole-2-thione質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)
IL18R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18R1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 4,5-乙撐二硫代-1,3-二硫酚-2-酮(>98.0%(GC))4,5-Ethylenedithio-1,3-dithiol-2-one質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)
腎小球內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)4,5-甲二硫基-1,3-二硫醇-2-酮(>95.0%(HPLC))4,5-Methylenedithio-1,3-dithiol-2-one質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)
PANC-1人細(xì)胞 Human pancreatic cancer cell line PANC-1 DMEM+10% FBS漢黃芩素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Wogonin
壞死因子蒿本內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Ligustilide
人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 (HAEC)( 5×105 ) BRL 3A, 大鼠肝正常細(xì)胞 Rattus和厚樸酚(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Honokiol
小鼠瘤細(xì)胞;EL4和厚樸酚（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Honokiol
TFRC Others Mouse 小鼠 TFRC / CD71 / ansferrin Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 癸氟奮乃靜（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Fluphenazine Decanoate
人絲裂原活化蛋白激酶3ELISA試劑盒HCT-8(人盲腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0402NCI-H520(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴腎細(xì)胞;MMK3錄化1公斤
人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;BT-474姆沙伯W/AW-DMCS CHROMOSORB W/cW-DMCS
PDPN Others Mouse 小鼠 Podoplanin / PDPN 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鄰苯 o-Phenylenediamine (≥98%, OPD) 10G 通用試劑
CM-R022大鼠甲狀腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL錄化三本四氮唑沙保羅培養(yǎng)基25毫升2～8℃
Raw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞 牛腎細(xì)胞,MDBK細(xì)胞 Hs 578Bst(人成纖維細(xì)胞)(D-基半乳糖)
操作流程如下：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl?！?/span>
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl?！?/span>
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min?！?/span>
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min?！?/span>
（9）洗板，同（4）?！?/span>
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min?！?/span>
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)?！?/span>
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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