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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 莼試 |
貨號(hào) | CS-E10867 |
用途 | 僅用于科研 |
檢測(cè)方法 | 詳見說明書 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
適應(yīng)物種 | 詳見說明書 |
檢測(cè)限 | 7.5ng/mL~240ng/mL |
數(shù)量 | 23 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
標(biāo)記物 | 詳見說明書 |
純度 | 98% |
樣本 | Aldolase isozyme A |
應(yīng)用 | 詳見說明書 |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司常年代理eBioscience品牌、Mercodia品牌、Panbio品牌、Alpco品牌、CST品牌、IBL-America品牌、AbFrontier品牌、Calbiotech品牌、Anogen品牌、Ani Biotech品牌、AAT Bioquest品牌、Jaica品牌等elisa試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 檢測(cè)范圍 |
人縮醛酶AELISA試劑盒 | Aldolase isozyme A | 7.5ng/mL~240ng/mL |
自備物品:
酶標(biāo)儀(450nm)
高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
37℃恒溫箱
自備的設(shè)備及試劑:
1. 450±10nm濾光片的酶標(biāo)儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱)
2. 單道或多道微量加液器及吸頭
3. 稀釋樣品的EP管
4. 蒸餾水或去離子水
5. 吸水紙
6. 盛放洗液的容器
試劑盒性能:
人縮醛酶AELISA試劑盒 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
靈敏度:*檢測(cè)濃度小于0.1 pg/mL。
特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10%、板間變異系數(shù)小于15%。
貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
有效期:6個(gè)月
雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原) | 間接法(檢測(cè)未知抗體) |
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。 2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。 3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。 4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。 | 1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。 2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照) 3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)*抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,*一遍用DDW洗滌。 4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。 |
樣品收集、處理及保存方法:
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
OP9 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞曲昔匹特(標(biāo)準(zhǔn)品)Troxipide質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
豬腎細(xì)胞;PK-15香蜂草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Isosakuranetin 7-O-rutinoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
BPH-1, 人細(xì)胞鹽酸萘替芬(標(biāo)準(zhǔn)品)Naftifine 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
人結(jié)細(xì)胞;T84 大鼠甲狀腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL碳酸鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)Calcium carbonate質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
神經(jīng)元細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)甲磺酸氨氯地平(標(biāo)準(zhǔn)品)Amlodipine mesylate質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
CL-0241VCaP(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2草酸鋰(>Lithium oxalate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
HUVEC-12, 人臍內(nèi)皮細(xì)胞系 昆蟲卵巢細(xì)胞,SF9細(xì)胞 NK-92(人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞)硬脂酸鋰(>Lithium stearate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-303,5-二-L-酪氨酸3,5-Diiodo-L-tyrosine dihydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CHIT1 Others Human 人 CHIT1 / Chitinase-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 氟氯西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Flucloxacillin 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)品
恒河猴腎細(xì)胞;MMK2巴利森苷A;派立辛Parishin A質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
NP Others H1N1 甲型 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 硬脂酸鉀(>質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRPotassium stearate
人胚胎腸粘膜組織來源細(xì)胞;CCC-HIE-21酸鉀一水(>質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRPotassium tartrate, hydrate
大鼠雪旺細(xì)胞;RSC96 橫紋肌瘤細(xì)胞,A-673細(xì)胞 SNL細(xì)胞,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染了neor和LIF基因的STO細(xì)胞株亞碲酸鉀(>質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRPotassium tellurite
lovo, 人細(xì)胞 Human四草酸鉀二水(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRPotassium tetraoxalate dehydrate
CD34 Others Mouse 小鼠 CD34 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 骨抑制素,人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BROsteostatin (human)
人縮醛酶AELISA試劑盒MHCC-97L人細(xì)胞(低轉(zhuǎn)移) MHCC-97L human hepatoma cells (low metastasis) DMEM+10%FBS聚乙二醇8000250克RT
TNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白姆沙伯 P NAW ChroMosorb P NcW;
人結(jié)膜纖維原細(xì)胞(HConF)(5×105 ) HAVSMC, 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Human聚乙二醇 3000 Poly(ethylene glycol) 3,000 (PEG 3000) 25322-68-3 250G 通用試劑
人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-30M-FC瓊脂25毫升
ENPEP Others Rat 大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A (aa 41-945) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (D-果糖-6-1酸二鈉)
操作流程如下:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl?!?/span>
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)?!?/span>
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl?!?/span>
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min?!?/span>
(9)洗板,同(4)?!?/span>
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min?!?/span>
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)?!?/span>
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。