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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 莼試 |
貨號(hào) | CS-E10950 |
用途 | 僅用于科研 |
檢測(cè)方法 | 詳見說明書 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
適應(yīng)物種 | 詳見說明書 |
檢測(cè)限 | 75pg/mL~2400pg/mL |
數(shù)量 | 24 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
標(biāo)記物 | 詳見說明書 |
純度 | 98% |
樣本 | aconitase 2 |
應(yīng)用 | 詳見說明書 |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司常年代理eBioscience品牌、Mercodia品牌、Panbio品牌、Alpco品牌、CST品牌、IBL-America品牌、AbFrontier品牌、Calbiotech品牌、Anogen品牌、Ani Biotech品牌、AAT Bioquest品牌、Jaica品牌等elisa試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 檢測(cè)范圍 |
人烏頭酸酶2ELISA試劑盒 | aconitase 2 | 75pg/mL~2400pg/mL |
自備物品:
酶標(biāo)儀(450nm)
高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
37℃恒溫箱
自備的設(shè)備及試劑:
1. 450±10nm濾光片的酶標(biāo)儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱)
2. 單道或多道微量加液器及吸頭
3. 稀釋樣品的EP管
4. 蒸餾水或去離子水
5. 吸水紙
6. 盛放洗液的容器
試劑盒性能:
人烏頭酸酶2ELISA試劑盒 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
靈敏度:*檢測(cè)濃度小于0.1 pg/mL。
特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10%、板間變異系數(shù)小于15%。
貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
有效期:6個(gè)月
雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原) | 間接法(檢測(cè)未知抗體) |
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。 2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。 3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。 4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。 | 1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。 2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照) 3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)*抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,*一遍用DDW洗滌。 4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。 |
樣品收集、處理及保存方法:
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
ZR-75-30細(xì)胞,癌細(xì)胞 人細(xì)胞,TE-11細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1內(nèi)消旋-2,3-二丁二酸(>98.0%(T))meso-2,3-Dimercaptosuccinic Acid質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B6吡哆醛-L-谷氨酸二鉀鹽[藥物研究配體]Pyridoxylidene-L-glutamic Acid Dipotassium Salt質(zhì)量規(guī)格:藥物研究配體
ERBB2 Others Human 人 ErbB2 / HER2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 吡哆醛-L-異亮氨酸鉀鹽[藥物研究配體]Pyridoxylidene-L-isoleucine Potassium Salt質(zhì)量規(guī)格:藥物研究配體
人真皮內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHDLEC NA1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷四鹽酸鹽(>98.0%(N))1,4,7,10-Tetraazacyclododecane Tetra質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(N)
小鼠海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞(MA-h)(5×105)己二酸雙(2-乙基己基)酯(>98.0%(GC))Bis(2-ethylhexyl) Adipate質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
A875細(xì)胞,人色素瘤細(xì)胞 阪崎腸桿菌 人紅系細(xì)胞;TF-12,4-十五二炔酸(>97.0%(T))2,4-Pentadecadiynoic Acid質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)
ANGPTL7 Protein Canine 重組狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (His 標(biāo)簽)10,12-二十三聯(lián)炔酸(>98.0%(GC)(T))10,12-Tricosadiynoic Acid質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
KB(人口腔表皮樣癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1,6-二1酸果糖三鈉鹽(98-101.0%,BR)Fructose 1,6-bisphosphate, 3 salt質(zhì)量規(guī)格:98-101.0%,BR
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A1,6-二1酸果糖三鈉鹽(98-101.0%,BR)Fructose 1,6-bisphosphate,3 salt質(zhì)量規(guī)格:98-101.0%,BR
CLEC4A2 Others Rat 大鼠 CLEC4A2 / DCIR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1酸銨(>99%,BR)L-Ammonium tartrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
K562細(xì)胞,慢性髓原 人胚肺二倍體細(xì)胞,HLF-02細(xì)胞 lovo, 人細(xì)胞DL-m-酪氨酸質(zhì)量規(guī)格:0.98DL-m-Tyrosine
豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL1肌氨酸甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:BR,98%H-Sar-OMe·HCl
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-異亮氨醇 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRL-Isoleucinol
CL-0345HB611(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2L-甲狀腺素鈉;四代甲狀腺素鈉鹽,T4質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRLevothyroxine
MFI2 Others Mouse 小鼠 MFI2 / CD228 / melanoansferrin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 利多卡因質(zhì)量規(guī)格:>98.5%
人烏頭酸酶2ELISA試劑盒SK-N-SH, 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞2,7-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環(huán)-2-基)-9,9-十二烷芴(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)2,7-Bis(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-9,9-dihexylfluorene
人成細(xì)胞;Saos-2 人脈絡(luò)膜微細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL1,4-二溴萘(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)1,4-Dibromonaphthalene
人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNAHA-c cDNA2,7-二溴芘(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)2,7-Dibromopyrene
DLL1 Others Rat 大鼠 DLL1 / Delta-like 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2,6-二溴蒽(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)2,6-Dibromoanthracene
小鼠Lewis瘤株;LLT2,7-二叔丁基芴(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2,7-Di-tert-butylfluorene
操作流程如下:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl?!?/span>
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl?!?/span>
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)?!?/span>
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)?!?/span>
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min?!?/span>
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。