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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 莼試 |
| 貨號(hào) | CS-E11107 |
| 用途 | 僅用于科研 |
| 檢測(cè)方法 | 詳見說明書 |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 適應(yīng)物種 | 詳見說明書 |
| 檢測(cè)限 | 62.5pg/mL~2000pg/mL |
| 數(shù)量 | 58 |
| 包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
| 標(biāo)記物 | 詳見說明書 |
| 純度 | 98% |
| 樣本 | Platelet-Derived Growth Factor-D |
| 應(yīng)用 | 詳見說明書 |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
公司常年代理eBioscience品牌、Mercodia品牌、Panbio品牌、Alpco品牌、CST品牌、IBL-America品牌、AbFrontier品牌、Calbiotech品牌、Anogen品牌、Ani Biotech品牌、AAT Bioquest品牌、Jaica品牌等elisa試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 檢測(cè)范圍 |
人血小板源性生長(zhǎng)因子DELISA試劑盒 | Platelet-Derived Growth Factor-D | 62.5pg/mL~2000pg/mL |
自備物品：
酶標(biāo)儀（450nm）
高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
37℃恒溫箱
自備的設(shè)備及試劑：
1. 450±10nm濾光片的酶標(biāo)儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱)
2. 單道或多道微量加液器及吸頭
3. 稀釋樣品的EP管
4. 蒸餾水或去離子水
5. 吸水紙
6. 盛放洗液的容器
試劑盒性能：
人血小板源性生長(zhǎng)因子DELISA試劑盒 準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。
靈敏度：*檢測(cè)濃度小于0.1 pg/mL。
特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10%、板間變異系數(shù)小于15%。
貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
有效期：6個(gè)月
| 雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原) | 間接法(檢測(cè)未知抗體) |
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。 2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。 3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。 4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。 5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。 | 1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。 2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照) 3、加酶標(biāo)抗體：于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)*抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,*一遍用DDW洗滌。 4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。 5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。 |
樣品收集、處理及保存方法：
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
大耳山羊腎細(xì)胞;LDG-2麗絲胺羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B Sulforhodamine B質(zhì)量規(guī)格：BS
A549/DDP細(xì)胞，耐DDP細(xì)胞 中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞,CHL細(xì)胞 CM-M002小鼠肺平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL麗絲胺羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B Sulforhodamine B質(zhì)量規(guī)格：BS
S-180(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2氯化羅丹明110；羅丹明110Rhodamine 110 chloride質(zhì)量規(guī)格：>99%
Gibco 10639011 STEM PRO-34- COMBO 500ml羅丹明123Rhodamine 123質(zhì)量規(guī)格：用于熒光標(biāo)記
人上皮細(xì)胞HREpiC曲美布汀堿Trimebutine base質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;CGM1檸檬酸銅(>98.5%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BRCopper(II) , hydrate
正常大鼠腎細(xì)胞;NRK 腺癌細(xì)胞，COLO-320細(xì)胞 ST細(xì)胞，豬細(xì)胞系(ST)氫氧化銅(>96.5%,Tech Grade)質(zhì)量規(guī)格：>96.5%,工業(yè)級(jí)Copper(II) hydroxide
Ca Ski, 人細(xì)胞 Human溴化鉀(光譜SP)質(zhì)量規(guī)格：光譜SPPotassium bromide
HAVCR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 偶氮胂Ⅰ水合物(90%)質(zhì)量規(guī)格：0.9Arsenazo I Hydrate
成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-sf無水硫酸鈉(SP)質(zhì)量規(guī)格：SP sulfate anhydrous
FLT4 Others Human 人 VEGFR3 / FLT4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-核糖質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRL-(+)-Ribose
CL-0308TE-13(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2L-核糖(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品L-(+)-Ribose
VNN1 Others Mouse 小鼠 VNN1 / Vanin-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2-脫氧-L-核糖質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR2-Deoxy-L-ribose
小鼠胰島細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLD-葡萄糖一水質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRD-Glucose, monohydrate
PC9人細(xì)胞 PC9 human lung cancer cells DMEM+10% FBS十二烷基硫酸鈉(分子生物學(xué)級(jí))質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級(jí)SDS
人血小板源性生長(zhǎng)因子DELISA試劑盒人細(xì)胞;Hela 229 [HeLa229]4'-羧基苯并-15-冠5-(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)4'-Carboxybenzo-15-crown 5-Ether
IFNB1 Others Mouse 小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 4'-羧基苯并-18-冠6-(>97.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)(T)4'-Carboxybenzo-18-crown 6-Ether
CRT 神經(jīng)細(xì)胞24-冠8-(>93.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>93.0%(GC)24-Crown 8-Ether
MHCC-97H人細(xì)胞(高轉(zhuǎn)移) MHCC-97H human hepatoma cells (high ansfer) DMEM+10%FBS二苯并-18-冠-6-(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)Dibenzo-18-crown 6-Ether
TNFSF8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (His 標(biāo)簽)13-乙基-18,19-二去甲基-17α-pregn-4-en-20-yn-17-ol(左炔諾孕酮雜質(zhì)D)質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口13-Ethyl-18,19-dinor-17α-pregn-4-en-20-yn-17-ol(Levonorgestrel Impurity D)
操作流程如下：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl?！?/span>
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl?！?/span>
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min?！?/span>
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min?！?/span>
（9）洗板，同（4）?！?/span>
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min?！?/span>
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)?！?/span>
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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