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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 莼試 |
| 貨號(hào) | CS-E11252 |
| 用途 | 僅用于科研 |
| 檢測方法 | 詳見說明書 |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 適應(yīng)物種 | 詳見說明書 |
| 檢測限 | 6.25U/L~200U/L |
| 數(shù)量 | 39 |
| 包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
| 標(biāo)記物 | 詳見說明書 |
| 純度 | 98% |
| 樣本 | Neprilysin |
| 應(yīng)用 | 詳見說明書 |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
公司常年代理eBioscience品牌、Mercodia品牌、Panbio品牌、Alpco品牌、CST品牌、IBL-America品牌、AbFrontier品牌、Calbiotech品牌、Anogen品牌、Ani Biotech品牌、AAT Bioquest品牌、Jaica品牌等elisa試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 檢測范圍 |
人中性內(nèi)肽酶;腦啡肽酶ELISA試劑盒 | Neprilysin | 6.25U/L~200U/L |
自備物品：
酶標(biāo)儀（450nm）
高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
37℃恒溫箱
自備的設(shè)備及試劑：
1. 450±10nm濾光片的酶標(biāo)儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱)
2. 單道或多道微量加液器及吸頭
3. 稀釋樣品的EP管
4. 蒸餾水或去離子水
5. 吸水紙
6. 盛放洗液的容器
試劑盒性能：
人中性內(nèi)肽酶;腦啡肽酶ELISA試劑盒 準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。
靈敏度：*檢測濃度小于0.1 pg/mL。
特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10%、板間變異系數(shù)小于15%。
貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
有效期：6個(gè)月
| 雙抗體夾心法(檢測未知抗原) | 間接法(檢測未知抗體) |
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。 2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。 3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。 4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。 5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。 | 1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。 2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對照) 3、加酶標(biāo)抗體：于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)*抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,*一遍用DDW洗滌。 4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。 5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。 |
樣品收集、處理及保存方法：
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人 (HPF)( 5×105 )槲皮素-7-O-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Quercetin-7-O-β-D-glucopyranoside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
CL-0277HCC94(人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化))5×106cells/瓶×2花椒毒酚（標(biāo)準(zhǔn)品）Xanthotol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
人肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H292 大鼠表皮色素細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL槐果堿（標(biāo)準(zhǔn)品）Sophocarpine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
MFC 小鼠細(xì)胞環(huán)氧澤瀉1(標(biāo)準(zhǔn)品)Alismoxide質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
TFRC Others Human 人 TFRC / CD71 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 黃柏堿（標(biāo)準(zhǔn)品）Phellodendrine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
TF Others Sus scrofa (Pig) 野豬 ansferrin / TF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甲磺酸加貝酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Gabexate mesylate
大鼠雪旺氏細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL地塞米,氟美質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Dexamethasone
UMNSAH/DF-1雞胚成纖維細(xì)胞 UMNSAH/DF-1 chicken embryo fibroblast DMEM培養(yǎng)基+10%FBS卡比多巴（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品(S)-Carbidopa
IFNW1 Protein Human 重組人 Ierferon omega-1 / IFNω / IFNW1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)醋酸氯地孕酮（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Chlormadinone Acetate
NCI-H209(人小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 MRC-5(胚肺細(xì)胞)醋酸氯地孕酮質(zhì)量規(guī)格：>98%Chlormadinone Acetate
CL-0397NCI-H23(人非小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2N-乙酰-D-丙氨酸質(zhì)量規(guī)格：98%,BRN-Acetyl-D-alanine
CTSH Others Mouse 小鼠 Cathepsin H / CTSH 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-乙酰-L-谷氨酰胺質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRN-Acetyl-L-Glutamine
人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪總RNAHMSC-ad NAN-乙酰-L-酪氨酸質(zhì)量規(guī)格：0.98N-Acetyl-L-Tyrosine
羊源細(xì)胞 人臍內(nèi)皮細(xì)胞，HUVEC細(xì)胞 15P-1細(xì)胞，轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細(xì)胞N-乙酰-L-色氨酸乙酯質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,BRAc-Trp-Oet
人胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-1N-乙酰-DL-色氨酸質(zhì)量規(guī)格：0.98N-Acetyl-DL-tryptophan
人中性內(nèi)肽酶;腦啡肽酶ELISA試劑盒CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,5-二1酸-D-核酮糖/1,5二1酸核酮糖質(zhì)量規(guī)格：90.0%,Sigmad-ribulose 1,5-diphosphate/RuDP
大鼠平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL酸性蛋白酶；蛋白酶來自佐氏曲霉質(zhì)量規(guī)格：BR,50u/mgAcidic Protease from Aspergillus
CHL倉鼠肺細(xì)胞 CHL hamster lung cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS撲草凈質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRPrometryn
FGF21 Protein Mouse 重組小鼠 FGF21 / Fibroblast Growth Factor 21 蛋白 (His 標(biāo)簽)蘿卜硫素；萊菔硫烷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品Sulforaphane
C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人平滑肌細(xì)胞HBSMC3-甲基菲(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)3-Methylphenanthrene
操作流程如下：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl?！?/span>
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min?！?/span>
（6）洗板，同（4）?！?/span>
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl?！?/span>
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）?！?/span>
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)?！?/span>
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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