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公司實驗室

察氏培養(yǎng)基
(Czapek-DoxAgar)

用途：

察氏培養(yǎng)基用于培養(yǎng)能以硝酸鹽作為*氮源的真菌和細(xì)菌，及青霉和曲霉等霉菌的分離培養(yǎng)和形態(tài)鑒別。

原理：

硝酸鈉提供氮源;磷酸氫二鉀是緩沖劑;硫酸鎂、氯化鉀、硫酸亞鐵提供必須的離子;蔗糖提供碳源;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。

察氏培養(yǎng)基配方(每升)：

硝酸鈉3g

磷酸氫二鉀1g

硫酸鎂0.5g

氯化鉀0.5g

硫酸亞鐵0.01g

蔗糖30g

瓊脂15g

最終pH 7.3±0.2

使用方法：

1、稱取察氏培養(yǎng)基50g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌20min，待冷至55—60℃傾注滅菌平板;或?qū)⑴囵B(yǎng)基溶解分裝三角瓶或試管，滅菌后倒平板或制成斜面。

2、將純培養(yǎng)物點植于平板上。方法是將平板倒轉(zhuǎn)，向上接種一點或三點，每菌接種兩個平板，倒置于25—28℃溫箱中培養(yǎng)。當(dāng)剛長出小菌落時，取出一個平皿，以無菌操作，用小刀將菌落連同培養(yǎng)基切下1cm×2cm的小塊，置菌落一側(cè)，繼續(xù)培養(yǎng)，于5—14d進(jìn)行觀察。

3、斜面觀察：將霉菌純培養(yǎng)物劃線接種(曲霉、青霉)或點種(鏈刀菌或其他菌)于斜面，培養(yǎng)5—14d，觀察菌落形態(tài)，同時還可以將菌種管置顯微鏡下用低倍鏡直接觀察孢子的形態(tài)和排列。

察氏培養(yǎng)基按成分可為三大培養(yǎng)基分類：
1) 合成培養(yǎng)基：
各種成分完全是已知遙各種化學(xué)物質(zhì) 組成成分精確 重復(fù)性強。
2) 天然培養(yǎng)基：
由天然物質(zhì)制成 這類培養(yǎng)基的化學(xué)成份不恒定 但配制方便 營養(yǎng)豐富培養(yǎng)效果好 常常被采用。
3) 半合成培養(yǎng)基：
在天然有機(jī)物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無機(jī)鹽類 或在合成培育基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分 更能有次的滿足微生物對營養(yǎng)的需要。
實驗方法：
1.培養(yǎng)基陽性組：取稀釋后的各試驗菌懸液1ml分別加于預(yù)先制備的試管培養(yǎng)基中，每種細(xì)菌接種兩支試管。同時分別取1ml菌懸液加于無菌空平皿中，用于計數(shù)，每種細(xì)菌做兩個平板。
2. 培養(yǎng)基陰性組：即空白對照，即不添加菌液。
3. 接種量計數(shù)：步驟1中的平皿中，細(xì)菌傾注胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基，霉菌和白色念珠菌傾注沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。同時每種培養(yǎng)基做1個空白。
4.培養(yǎng)條件：
   無菌檢查：20～25℃培養(yǎng)14天或直至出現(xiàn)渾濁（不超過14天）
   MPN計數(shù)：30～35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天
   控制菌檢查：30～35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24小時
   傾注計數(shù)用的的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板置30～35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天
   傾注計數(shù)用的沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板置20～25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3～5天
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-8 [HRT-18]三乙?；?/span>-β-環(huán)糊精(>97.0%(HPLC))Triacetyl-β-cyclodextrin質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(HPLC)

FGFRL1 Others Mouse 小鼠 FGFRL1 / FGFR5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 10,12-二十七二炔酸(>98.0%(GC))10,12-Heptacosadiynoic Acid質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A52,4-十七二炔酸(>95.0%(T))2,4-Heptadecadiynoic Acid質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)

BAMBI Others Mouse 小鼠 BAMBI / NMA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,4-二十一二炔酸(>95.0%(T))2,4-Heneicosadiynoic Acid質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)

人*上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL10,12-十七二炔酸(>97.0%(T))10,12-Heptadecadiynoic Acid質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)
小鼠前低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);MFC-B5-GFPN-十八烷酰-D-鞘氨醇N-Stearoyl-D-Sphingosine質(zhì)量規(guī)格：

ALCAM Others Mouse 小鼠 ALCAM / CD166 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-去異丁基-N-丙基利福布汀N-Desisobutyl-N-propyl Rifabutin質(zhì)量規(guī)格：

人表皮色素細(xì)胞-中色素裂解物HELM-m L25-去乙?；娡?/span>25-Desacetyl Rifapentin質(zhì)量規(guī)格：

CD83 Others Rat 大鼠 CD83 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 利魯唑-13C,15N2Riluzole-13C,15N2質(zhì)量規(guī)格：

人腦成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLN-羥基利魯唑N-Hydroxy Riluzole質(zhì)量規(guī)格：
人非色素睫狀上皮細(xì)胞 (HNPCEpiC)( 5×105 )吡拉西坦（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Piracetam

CM-M019小鼠腮腺細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL夫拉扎勃（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測定Furazabol

小鼠細(xì)胞;EL4 小鼠*上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL乙水楊胺（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定2-Ethoxybenzamide

小鼠神經(jīng)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) Mouse枸櫞酸（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Citric acid monohydrate

ACRV1 Others Human 人 SP-10 / ACRV1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 神經(jīng)肽Y（2-36），人，大鼠質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRNeuropeptide Y (2-36) (human,rat) 
察氏培養(yǎng)基培養(yǎng)基制備的標(biāo)準(zhǔn)操作：
↓在玻璃容器中加入所需蒸餾水的二分之一量，放入一定量的培養(yǎng)基干粉，輕輕攪拌以促進(jìn)溶解；
↓高壓滅菌前可用pH計或精密pH試紙校正培養(yǎng)基的pH值；
↓液體培養(yǎng)基一般要在滅菌前分裝，分裝時應(yīng)注意每管的分裝量不應(yīng)高于試管的2/3。瓊脂平板是在培養(yǎng)基高壓滅菌后冷至50-600C時再傾注平板。
↓質(zhì)量檢查
    →將制好的培養(yǎng)基在350C孵育過夜，判定是否滅菌合格。
    →按不同的培養(yǎng)要求，接種相應(yīng)的菌種，觀察細(xì)菌的發(fā)育、菌落形態(tài)、色素、溶血等特征，判斷培養(yǎng)基是否符合要求。
↓液體培養(yǎng)基及瓊脂平板須在40℃的條件下保存，保質(zhì)期一般為一周，如用塑料袋密封，則至多可以保存2周的時間。