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公司實(shí)驗(yàn)室

EC肉湯
(ECMedium)

用途：

EC肉湯用于多管發(fā)酵法測定糞大腸菌群和大腸桿菌的確證試驗(yàn)(GB/T4789.38-2008，GB/T4789.39-2008和SN0169-92，ISO標(biāo)準(zhǔn))。

原理：

胰蛋白胨提供碳氮源;3號膽鹽抑制革蘭氏陽性菌，特別抑制革蘭氏陽性桿菌和糞鏈球菌;乳糖是可發(fā)酵的糖類;磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀為緩沖劑;氯化鈉可維持均衡的滲透壓。

配方(每升)：

胰蛋白胨20g

3號膽鹽1.5g

乳糖5g

磷酸氫二鉀4g

磷酸二氫鉀1.5g

氯化鈉5g

最終pH6.9±0.2

使用方法：

1、 稱取EC肉湯37g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝于帶有小倒管的試管中，121℃高壓滅菌15min，待冷至常溫，備用。

2、 用接種環(huán)將所有產(chǎn)氣的乳糖膽鹽發(fā)酵管或LST肉湯管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于EC肉湯管中。

3、 將EC肉湯管置44.5±0.2℃水浴箱內(nèi)(水浴箱的水面應(yīng)高于EC肉湯液面)，培養(yǎng)24±2h。

4、 觀察結(jié)果。按產(chǎn)氣管數(shù)，查MPN表報告每克(mL)樣品中糞大腸菌群的MPN值。

EC肉湯圖片按成分可為三大培養(yǎng)基分類：
1) 合成培養(yǎng)基：
各種成分完全是已知遙各種化學(xué)物質(zhì) 組成成分精確 重復(fù)性強(qiáng)。
2) 天然培養(yǎng)基：
由天然物質(zhì)制成 這類培養(yǎng)基的化學(xué)成份不恒定 但配制方便 營養(yǎng)豐富培養(yǎng)效果好 常常被采用。
3) 半合成培養(yǎng)基：
在天然有機(jī)物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無機(jī)鹽類 或在合成培育基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分 更能有次的滿足微生物對營養(yǎng)的需要。
實(shí)驗(yàn)方法：
1.培養(yǎng)基陽性組：取稀釋后的各試驗(yàn)菌懸液1ml分別加于預(yù)先制備的試管培養(yǎng)基中，每種細(xì)菌接種兩支試管。同時分別取1ml菌懸液加于無菌空平皿中，用于計(jì)數(shù)，每種細(xì)菌做兩個平板。
2. 培養(yǎng)基陰性組：即空白對照，即不添加菌液。
3. 接種量計(jì)數(shù)：步驟1中的平皿中，細(xì)菌傾注胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基，霉菌和白色念珠菌傾注沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。同時每種培養(yǎng)基做1個空白。
4.培養(yǎng)條件：
   無菌檢查：20～25℃培養(yǎng)14天或直至出現(xiàn)渾濁（不超過14天）
   MPN計(jì)數(shù)：30～35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天
   控制菌檢查：30～35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24小時
   傾注計(jì)數(shù)用的的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板置30～35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天
   傾注計(jì)數(shù)用的沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板置20～25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3～5天
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM9801 人脈絡(luò)膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL紫花前胡苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Nodakenin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基TM-prf紫蓳靈（標(biāo)準(zhǔn)品）Corynoline質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

EPO Others Mouse 小鼠 Erythropoietin / EPO 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 紫云英苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Astragaline質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL棕櫚酸（標(biāo)準(zhǔn)品）Palmitic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CV-1細(xì)胞，非洲綠猴腎細(xì)胞 HPAC(人*癌細(xì)胞) CM-H010人小氣道上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL王不留行黃酮苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Vaccarin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
Hepa 1-6(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0458U-118 MG(人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2 人胎兒胸腺細(xì)胞株;HFT-8810 [HFT8810]地塞米,氟美（標(biāo)準(zhǔn)品）Dexamethasone質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人卵巢;PA-1鹽酸地爾硫卓Diltiazem HCL 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

NCAM1 Others Rat 大鼠 NCAM1 / CD56 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸地爾硫卓(標(biāo)準(zhǔn)品)Diltiazem HCL 質(zhì)量規(guī)格：含量測定，標(biāo)準(zhǔn)品

CL-0433RWPE-2(人正常細(xì)胞)5×106cells/瓶×2地美司鈉Dimesna 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

SL-7細(xì)胞，胚肺細(xì)胞 人上皮細(xì)胞,RWPE2細(xì)胞 人上皮細(xì)胞;MCF-10A甲磺酸多拉司瓊Dolasetron mesylate 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR
豬腎傳代細(xì)胞;IBRS-25-溴尿苷(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR5-Bromouridine

PDCD1 Others Human 人 PD1 / PDCD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) ADA緩沖液二鈉鹽(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRADA buffer, disodium salt

CM-M007小鼠上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL非那雄胺（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Finasteride

RETN Others Mouse 小鼠 Resistin / ADSF / RETN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氟羅沙星質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRFleroxacin

小鼠腎足突細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氟羅沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Fleroxacin 
EC肉湯圖片培養(yǎng)基制備的標(biāo)準(zhǔn)操作：
↓在玻璃容器中加入所需蒸餾水的二分之一量，放入一定量的培養(yǎng)基干粉，輕輕攪拌以促進(jìn)溶解；
↓高壓滅菌前可用pH計(jì)或精密pH試紙校正培養(yǎng)基的pH值；
↓液體培養(yǎng)基一般要在滅菌前分裝，分裝時應(yīng)注意每管的分裝量不應(yīng)高于試管的2/3。瓊脂平板是在培養(yǎng)基高壓滅菌后冷至50-600C時再傾注平板。
↓質(zhì)量檢查
    →將制好的培養(yǎng)基在350C孵育過夜，判定是否滅菌合格。
    →按不同的培養(yǎng)要求，接種相應(yīng)的菌種，觀察細(xì)菌的發(fā)育、菌落形態(tài)、色素、溶血等特征，判斷培養(yǎng)基是否符合要求。
↓液體培養(yǎng)基及瓊脂平板須在40℃的條件下保存，保質(zhì)期一般為一周，如用塑料袋密封，則至多可以保存2周的時間。