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冷凍保存細胞之方法？
大鼠成纖維細胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Airway PrimacellTM：Normal Bronchial Fibroblasts冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細胞都是現(xiàn)貨供應，詳細大鼠成纖維細胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Airway PrimacellTM：Normal Bronchial Fibroblasts說明書！

大鼠成纖維細胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Airway PrimacellTM：Normal Bronchial Fibroblasts

     大鼠成纖維細胞分離自正常大鼠組織，呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。成纖維細胞是結(jié)締組織中最常見的一種細胞。可在后修復組織。 雖然組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的組織片能使得組織中成細胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將成細胞分離開來。本試劑盒適用于分離培養(yǎng)新生兒或成年人的成細胞。本體系提供了*的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以*程度地降低所培養(yǎng)的成原代細胞中成纖維細胞的含量。 大鼠成纖維細胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)人的成組織細胞。本試劑盒包含： （1）OptiTDSTM大鼠成纖維細胞組織解離液（3×1ml） （2）大鼠成纖維細胞組織處理緩沖液（100ml） （3）FibrOutTM大鼠成纖維細胞成纖維抑制劑（1ml（500x）） （4）大鼠成纖維細胞組織洗液（5x100 ml） （5）大鼠成纖維細胞生長因子（1ml 500x）及血清（5x10ml） （6）大鼠成纖維細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基（5x100 ml） （7）大鼠成纖維細胞組織預備液（1 x100 ml） （8）大鼠成纖維細胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度?？萍继峁┑募毎袠藴实蔫b定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務(wù)標準。
      保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
大鼠成纖維細胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Airway PrimacellTM：Normal Bronchial Fibroblasts對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細胞凍存】
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞加巴噴丁-d4Gabapentin-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進口

人胚肺二倍體細胞;HEL-2 人胎盤羊膜細胞完全培養(yǎng)基 100mL加巴噴丁-內(nèi)酰胺Gabapentin-lactam質(zhì)量規(guī)格：美國進口

人氣管平滑肌細胞RNAHTSMC miRNA5 μg加巴噴丁相關(guān)化合物BGabapentin Related Compound B質(zhì)量規(guī)格：美國進口

CAMK1G Others Human 人 CAMK1G / CLICK III / CaMKIgamma 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 加巴噴丁相關(guān)化合物EGabapentin Related Compound E質(zhì)量規(guī)格：美國進口

小耳豬腎細胞;SEPfk加巴噴丁相關(guān)化合物DGabapentin Related Compound D質(zhì)量規(guī)格：美國進口

CLEC1B Others Human 人 CLEC1B / CLEC2 人細胞裂解液 (陽性對照) 苯磺酸貝托司汀質(zhì)量規(guī)格：>98.5%Bepotastine besilate

HS683 人腦細胞葉綠素銅鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRSodium copper chlorophyllin

SW 780 [SW-780, SW780]人膀胱移行細胞癌 SW 780 [SW-780, SW780] in human bladder ansitional cell carcinoma L-15培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS溴螨酯標準溶液(100μg/ml,u=2%)質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=2%Bromopropylate solution

VEGFA Protein Danio rerio (zebrafish) 重組斑馬魚 VEGF / VEGFA / VEGF165 蛋白溴螨酯標準溶液(10μg/ml,u=2%)質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=2%Bromopropylate solution

大鼠淋巴纖維細胞(RLF)(5×105) BPH-1, 人細胞 Human溴硝醇(標準品)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品Bronopol

HSAEpC-c 人類氣道上皮細胞(HSAEpC) 500,000cells 組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml3-氧西酞普蘭質(zhì)量規(guī)格：美國進口3-Oxo Citalopram

原代腎實質(zhì)細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml(R)-草酸西酞普蘭質(zhì)量規(guī)格：美國進口(R)-Citalopram Oxalate

IFNA8 Others Cynomolgus 食蟹猴 Ierferon alpha-B / IFNA8 人細胞裂解液 (陽性對照) 西酞普蘭N-氧化物質(zhì)量規(guī)格：美國進口Citalopram N-Oxide

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2(S)-西酞普蘭N-氧化物質(zhì)量規(guī)格：美國進口(S)-Citalopram N-Oxide

Calu-6細胞，人細胞系(未分化) 大鼠肝星形細胞,CFSC-2G細胞 CM-M097小鼠皮下脂肪細胞完全培養(yǎng)基100mL去甲基雷諾嗪質(zhì)量規(guī)格：美國進口Desmethyl Ranolazine

大鼠成纖維細胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Airway PrimacellTM：Normal Bronchial Fibroblasts人絨毛膜內(nèi)皮細胞西羅莫司，英文名或英文縮寫：Rapamycin，級別：BR，85%，規(guī)格：2KU

人胚腎細胞;293 Cells, low passage 人心室肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL聯(lián)本酰 Bqnzil 134-81-6

人RNAHPF miRNA5 μg尿苷-5′-單嶙酸，英文名或英文縮寫：U 5′-P，級別：BR，98%，規(guī)格：50毫克

IGSF8 Others Human 人 PGRL / IGSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) 正十三烷，英文名或英文縮寫：Tridecane，級別：SP，98.5%，規(guī)格：5克

小香豬皮膚細胞;SSC-S2MTT 250mg/500mg/1g Amresco分裝

【復蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶，對細胞造成損害。復旦細胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價格，本公司出售的所有細胞僅供科研使用。