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冷凍保存細(xì)胞之方法？
人椎間盤(pán)髓核組織提取物 Intervertebral Disc: Normal Human Intervertebral disc nucleus pulposus Derivatives冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)人椎間盤(pán)髓核組織提取物 Intervertebral Disc: Normal Human Intervertebral disc nucleus pulposus Derivatives說(shuō)明書(shū)！

人椎間盤(pán)髓核組織提取物 Intervertebral Disc: Normal Human Intervertebral disc nucleus pulposus Derivatives

     椎間盤(pán)是位于人體脊柱兩椎體之間，由軟骨板、纖維環(huán)、髓核組成的一個(gè)密封體。公司科技提供來(lái)自新鮮或冷凍人椎間盤(pán)髓核組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
      發(fā)貨：客戶(hù)可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿(mǎn)50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶(hù)可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
人椎間盤(pán)髓核組織提取物 Intervertebral Disc: Normal Human Intervertebral disc nucleus pulposus Derivatives對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱(chēng)凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

CST7 Others Human 人 Cystatin-F / CST7 / Cystatin-7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 帕米磷酸二鈉Pamidronate Disodium質(zhì)量規(guī)格：>99%,五水合物

人上皮細(xì)胞總RNAHBEpiC NA帕米磷酸二鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）Pamidronate Disodium質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

ELK1 Others Human 人 ELK1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硫酸慶大霉素Gentamicin sulfate 質(zhì)量規(guī)格：>590IU/MG,BR

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1硫酸慶大霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Gentamicin sulfate 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

QGY-7701細(xì)胞，細(xì)胞 人宮頸上皮細(xì)胞癌,Ski細(xì)胞 KM小鼠子瘤株;U27頭孢呋辛鈉Cefuroxime Sodium 質(zhì)量規(guī)格：>855ug/MG,USP30

人細(xì)胞;HOSDMT保護(hù)性-2'-甲氧基尿苷DMT-2'-OMe-U質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12] T淋巴細(xì)胞細(xì)胞，HuT78細(xì)胞 Mv.1.Lu(NBL-7)細(xì)胞，貂肺上皮細(xì)胞5’-DMT-2’-TBDMS-Bz-rC5’-DMT-2’-TBDMS-Bz-rC質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

SKOV3 [SK-OV-3], 人腺癌細(xì)胞系 Human5’-DMT-2’-TBDMS-rU5’-DMT-2’-TBDMS-rU質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

LCN1 Others Human 人 LCN1 / VEGP / Lipocalin-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 5’-DMT-2’-TBDMS-iBu-rG5’-DMT-2’-TBDMS-iBu-rG質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml5’-DMT-2’-TBDMS-Ac-rC5’-DMT-2’-TBDMS-Ac-rC質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2,4,5,6-四氨基嘧啶硫酸鹽(≥98.0%)質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%2,4,5,6-Tetraaminopyrimidine sulfate salt

人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞裂解物HASMCL煙酸甲酯(99%)質(zhì)量規(guī)格：0.99Methyl nicotinate

SK-HEP-1細(xì)胞，人細(xì)胞 人低轉(zhuǎn)移細(xì)胞,95-C細(xì)胞 腦動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)N-甲基-N-(三甲基硅基)乙酰胺(97%)質(zhì)量規(guī)格：0.97N-Methyl-N-(trimethylsilyl)acetamide

兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;CCC-SMC-1苔黑酚一水合物(98%)質(zhì)量規(guī)格：0.98Orcinol monohydrate

TIMP1 Others Human 人 TIMP-1 / TIMP1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2,2’-脫水尿苷；環(huán)尿苷質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR2,2'-O-Cyclouridine

人椎間盤(pán)髓核組織提取物 Intervertebral Disc: Normal Human Intervertebral disc nucleus pulposus DerivativesCST6 Others Human 人 CystatinE / CST6 / CystatinM 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 順丁希二酸二丁酯shēng huà shì jì容量：25克

人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS烯炳基三基硅烷 cllyltriMqthylsilcnq 1976/7/1

SRGN Others Human 人 Serglycin / SRGN 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 啊奇讀速相關(guān)物質(zhì)H czithroMycin Rqlctqd CoMpound H;2-(2H-Bqnzotriczol-2-yl)-p-crqsol 61069-30-4

HEC-1-B 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞L-賴(lài)酸鹽酸鹽shēng huà shì jì容量：RT，避光25克

ACHN人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 ACHN human renal cell carcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBSToluidineplueO 5g/25g/50g原裝 Amresco 0672

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。