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冷凍保存細(xì)胞之方法？
乳腺上皮細(xì)胞和原代細(xì)胞提取物 Human Breast MatchPair: Normal Mammary Epithelial Cell Derivatives and Primary Tumor Cell Derivatives冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)乳腺上皮細(xì)胞和原代細(xì)胞提取物 Human Breast MatchPair: Normal Mammary Epithelial Cell Derivatives and Primary Tumor Cell Derivatives說明書！

乳腺上皮細(xì)胞和原代細(xì)胞提取物 Human Breast MatchPair: Normal Mammary Epithelial Cell Derivatives and Primary Tumor Cell Derivatives

     人乳腺上皮細(xì)胞和原代細(xì)胞提取物是從人乳腺上皮細(xì)胞和細(xì)胞中提取的，人乳腺上皮細(xì)胞和細(xì)胞分別從正常人乳腺組織和組織中制備。正常人乳腺組織和組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
乳腺上皮細(xì)胞和原代細(xì)胞提取物 Human Breast MatchPair: Normal Mammary Epithelial Cell Derivatives and Primary Tumor Cell Derivatives對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

VEGFA Protein Human 重組人 VEGF121 / VEGF-A 蛋白普魯卡因青霉素GPenicillin G procaine質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

狗間葉干細(xì)胞(脂肪)(5×105) GBC-SD, 人細(xì)胞 Human芐星青霉素GPenicillin G benzathine salt質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

腮腺細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)尼泊金異丁酯-d9Isobutyl-d9 Paraben質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

TEK Others Mouse 小鼠 Tie2 / TEK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 尼泊金異丁酯Isobutyl Paraben質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

大鼠腎小管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL尼泊金異丙酯Isopropyl Paraben質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

FCGR3 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD16 / FCGR3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 維A酸;(標(biāo)準(zhǔn)品)All-Trans-Retinoic Acid\Tretinoin質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

LX-2 人肝星形細(xì)胞比卡魯胺Bicalutamide質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P16-姜烯酚（標(biāo)準(zhǔn)品）6-Shogaol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

HCT116, 人結(jié)細(xì)胞絞股藍(lán)皂苷XLIX(標(biāo)準(zhǔn)品)Gypenoside XLIX質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3-VP16-TNFa 大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLYM-201636YM201636質(zhì)量規(guī)格：>98%,PIKfyve抑制劑

CL-0199RSC96(大鼠雪旺細(xì)胞)5×106cells/瓶×22-萘甲酰氯(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)2-Naphthoyl Chloride

ALPI Others Human 人 Alkaline Phosphatase / ALPI 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-二甲基氨基肉桂醛(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)4-Dimethylaminocinnamaldehyde

小鼠食管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL2,3-萘二羧酸酐(>95.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)(T)2,3-Naphthalenedicarboxylic Anhydride

MDCK[NBL-2]狗腎上皮細(xì)胞 MDCK[NBL-2] canine kidney epithelial cells MEM+10% FBS2,4,6-三(十五氟庚基)-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)2,4,6-3(pentadecafluoroheptyl)-1,3,5-triazine

白細(xì)胞介素-6超家族5-(2-氨乙基氨基)-1-萘磺酸鈉水合物(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)Sodium 5-(2-Aminoethylamino)-1-naphthalenesulfonate Hydrate

乳腺上皮細(xì)胞和原代細(xì)胞提取物 Human Breast MatchPair: Normal Mammary Epithelial Cell Derivatives and Primary Tumor Cell DerivativesTNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)SALICYLICACID水楊酸鈉高純級100G54-21-6RT

大鼠神經(jīng)黑質(zhì)細(xì)胞(RNsn)(1×106) BxPC-3, 人原位*腺癌細(xì)胞株 Human錄化鉍 Bismuth trichloridq 7787-60-

人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]AIBI偶氮二異基咪唑啉鹽酸鹽500毫克AR

IL1R2 Others Mouse 小鼠 IL1R2 / CD121b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) TRIS-GLYCInepUFFER,10XSOLUTIONTris-甘酸緩沖液蛋白組學(xué)級1LCOLD

人腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL(多效唑)

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。