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冷凍保存細(xì)胞之方法？
小鼠腎小管上皮細(xì)胞提取物 Mouse Kidney: Normal Renal Tubular Derivatives冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)小鼠腎小管上皮細(xì)胞提取物 Mouse Kidney: Normal Renal Tubular Derivatives說(shuō)明書(shū)！

小鼠腎小管上皮細(xì)胞提取物 Mouse Kidney: Normal Renal Tubular Derivatives

     小鼠腎小管上皮細(xì)胞提取物是從小鼠原代腎小管上皮細(xì)胞提取的，小鼠原代腎小管上皮細(xì)胞從正常小鼠腎小管組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
      發(fā)貨：客戶(hù)可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿(mǎn)50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶(hù)可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
小鼠腎小管上皮細(xì)胞提取物 Mouse Kidney: Normal Renal Tubular Derivatives對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱(chēng)凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

大鼠肺泡巨噬細(xì)胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]三氧化二鉻(>99%，BR)Chromium (III) oxide質(zhì)量規(guī)格：>99%，BR

PLC/PRF/5細(xì)胞，人亞歷山大細(xì)胞系 小鼠胚成纖維包裝細(xì)胞,PA317細(xì)胞 CL-0018A9(小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞)5×106cells/瓶×2四氧化三鈷(>99%，BR)Cobalt (II, III ) oxide質(zhì)量規(guī)格：>99%，BR

SPC-A-1(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2乙酸鈷四水(>99.5%,BR)Cobaltous acetate, tetrahydrate質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,BR

HDMEC-c adult 人真皮微內(nèi)皮細(xì)胞(HDMEC)來(lái)自成年捐獻(xiàn)者 500,000cells 肝竇內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)鈷粉(>99%，BR)Cobaltous powder質(zhì)量規(guī)格：>99%，BR

小梁網(wǎng)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)銅粉(>99.5%,BR)Copper powder質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,BR

人臍內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC 人*星狀細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL耐爾藍(lán)A(>65%,BS)Nile blue A質(zhì)量規(guī)格：>65%,BS

人癌細(xì)胞;MDA-MB-157N-CBZ-beta-丙氨酸Z-β-Ala-OH質(zhì)量規(guī)格：0.98

TYRP1 Others Human 人 P1 / TYRP1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) CBZ-D-谷氨酸α-芐酯Z-Glu-OBzl質(zhì)量規(guī)格：>98%

CM-H134人角膜內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLN-芐氧羰基-L-酪氨酸Z-Tyr-OH質(zhì)量規(guī)格：0.98

CNE1, 人細(xì)胞系 草魚(yú)吻端細(xì)胞,ZC-7901細(xì)胞 SW480 [SW-480](人細(xì)胞)Z-L-酪氨酸甲酯Z-Tyr-OMe質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

豚鼠肺細(xì)胞;GP-F1氟他胺（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Flutamide

CA14 Others Human 人 CA14 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 環(huán)磷酰胺質(zhì)量規(guī)格：>98%,一水合物USP,BRCyclophosphamide

CL-0443SK-N-MC(人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2環(huán)磷酰胺（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Cyclophosphamide

NLGN1 Others Mouse 小鼠 Neuroligin 1 / NLGN1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氨基比林質(zhì)量規(guī)格：>98%,ARAmidopyrine/aminopyrine

大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL緊張素II質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,BRAngiotensin II

小鼠腎小管上皮細(xì)胞提取物 Mouse Kidney: Normal Renal Tubular DerivativestTA基因修飾的小鼠(B類(lèi));P19-CAG-tTA-1F33,3',4,4'-聯(lián)本四，英文名或英文縮寫(xiě)：DAB，級(jí)別：BR，85%，規(guī)格：100克

SGC-7901細(xì)胞，胃腺癌細(xì)胞 人細(xì)胞,Eca-109細(xì)胞 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12](R)-(+)-叔丁基亞磺酰安 (R)-(+)-2-Mqthyl-2-propcnqsulfincmidq 19699-78-9

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A5L-西代胱安基醋 L-SqLqNOCYSTINq 961-88-3

VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / CD106 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 失水蘋(píng)果酸酐，英文名或英文縮寫(xiě)：MA，級(jí)別：CP，規(guī)格：25克

人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2150-25-4N,N-二甘酸 (BICINE)Bicine

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。