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冷凍保存細(xì)胞之方法？
人乳腺上皮細(xì)胞提取物 Human Mammary : Normal Mammary Epithelial Cell Derivatives冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)人乳腺上皮細(xì)胞提取物 Human Mammary : Normal Mammary Epithelial Cell Derivatives說(shuō)明書(shū)！

人乳腺上皮細(xì)胞提取物 Human Mammary : Normal Mammary Epithelial Cell Derivatives

     人乳腺上皮細(xì)胞提取物是從人乳腺上皮細(xì)胞提取的，人乳腺上皮細(xì)胞從正常人乳腺組織制備。正常人乳腺組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
人乳腺上皮細(xì)胞提取物 Human Mammary : Normal Mammary Epithelial Cell Derivatives對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

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人導(dǎo)管癌細(xì)胞;HCC38Prosapogenin CP6Prosapogenin CP6質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

LIF Others Mouse 小鼠 LIF 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) CrovatinCrovatin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

COLO 205 人細(xì)胞CroverinCroverin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

U-2 OS-EGFP+puro人細(xì)胞 U-2 human osteosarcoma cell line OS-EGFP+puro McCoy's 5A+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycinlevatinlevatin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

IL15 Protein Human 重組人 IL-15 / IL15 / Ierleukin 15 蛋白 (His 標(biāo)簽)鹽酸尼非卡蘭質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRNifekalant hydrochloride

人小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(HM) ( 5×105 ) 人海馬神經(jīng)元 Human鹽酸尼非卡蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Nifekalant hydrochloride

CM-H041人直腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL醋酸舍莫瑞林 質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%Sermorelin Acetate

EPHA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphA4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 磺胺嘧啶銀質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP31,BRSilver Sulfadiazine

人神經(jīng)細(xì)胞HN磺胺嘧啶銀(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Silver Sulfadiazine

人乳腺上皮細(xì)胞提取物 Human Mammary : Normal Mammary Epithelial Cell DerivativesCM-R034大鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL1-氮雜-15-冠-5-醚(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)1-Aza-15-crown 5-Ether

SGC-7901/VCR細(xì)胞，人耐VCR胃腺癌細(xì)胞 人神經(jīng)細(xì)胞,BT-325細(xì)胞 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-71-氮雜-18-冠-6-醚(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)1-Aza-18-crown 6-Ether

COS-7(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21-氮雜-12-冠4-醚(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)1-Aza-12-crown 4-Ether

CA12 Others Human 人 CA12 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4'-乙酰苯并-15-冠-5-醚(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)4'-Acetylbenzo-15-crown 5-Ether

人胎兒胸腺細(xì)胞株;HFT-8810 [HFT8810]1,3-二氨基胍鹽酸鹽 質(zhì)量規(guī)格：>98%1,3-Diaminoguanidine Monohydrochloride

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。