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冷凍保存細(xì)胞之方法？
人小梁網(wǎng)細(xì)胞提取物 Human Eyes: Normal Trabecular Meshwork Cells Derivatives冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)人小梁網(wǎng)細(xì)胞提取物 Human Eyes: Normal Trabecular Meshwork Cells Derivatives說明書！

人小梁網(wǎng)細(xì)胞提取物 Human Eyes: Normal Trabecular Meshwork Cells Derivatives

     人小梁網(wǎng)細(xì)胞提取物是從人原代小梁網(wǎng)細(xì)胞提取的，人原代小梁網(wǎng)細(xì)胞從正常人小梁網(wǎng)組織制備。正常人小梁網(wǎng)組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
人小梁網(wǎng)細(xì)胞提取物 Human Eyes: Normal Trabecular Meshwork Cells Derivatives對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

小鼠髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞;PIEC（標(biāo)準(zhǔn)品）Coumarin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

人尿道上皮細(xì)胞(HUC)(5×105)茜素Alizarin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CL-0155ME-180(人子宮頸表皮癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2姜黃素Curcumin質(zhì)量規(guī)格：姜黃素類化合物>95%,姜黃素>75%,去甲氧基姜黃素<20%

人非小細(xì)胞;NCI-H1975 大鼠視網(wǎng)膜微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL姜黃素（標(biāo)準(zhǔn)品）Curcumin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

b16 小鼠細(xì)胞姜黃素（高純）Curcumin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%,BR

LncaP, 人細(xì)胞 腹水瘤,SRS-82細(xì)胞 TOV-112D(人上皮性細(xì)胞)馬來酸阿森那平Asenapine Maleate質(zhì)量規(guī)格：>99%

轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細(xì)胞;15P-1ZSTK474ZSTK474；ZSTK-474質(zhì)量規(guī)格：>98%，I型PI3K亞型抑制劑

FCGR1 Others Mouse 小鼠 CD64 / FCGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷Luteolin 7-O-glucuronide質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，標(biāo)準(zhǔn)品

人細(xì)胞;RPMI-8226 [RPMI8826]STA-9090;STA9090Ganetespib質(zhì)量規(guī)格：>98%,HSP90抑制劑

PDE3A Others Human 人 PDE3A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 赤芝酸DLucidenic acid D質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%

人表皮黑色素細(xì)胞-深色素HEM-d利培酮（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Risperidone

Hs 683細(xì)胞，人腦視神經(jīng)細(xì)胞 人癌細(xì)胞,MDA-MB-468細(xì)胞 動(dòng)物上皮細(xì)胞培養(yǎng)基EpiCM-a利托那韋(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Ritonavir

大額牛肺細(xì)胞;BFR-L1地達(dá)諾辛；去羥肌苷質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRDideoxyinosine;Didanosine

LXN Others Human 人 Latexin / LXN / TCI 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 淫羊藿次苷I質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Icariin I;  Icariside I

CM-H068人膀胱上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL寶藿苷II；大花淫羊藿苷A；意卡瑞苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品Baohuoside II

人小梁網(wǎng)細(xì)胞提取物 Human Eyes: Normal Trabecular Meshwork Cells Derivatives人細(xì)胞;Hela 229 [HeLa229]4'-羧基苯并-15-冠5-醚(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)4'-Carboxybenzo-15-crown 5-Ether

IFNB1 Others Mouse 小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 4'-羧基苯并-18-冠6-醚(>97.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)(T)4'-Carboxybenzo-18-crown 6-Ether

CRT 神經(jīng)細(xì)胞24-冠8-醚(>93.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>93.0%(GC)24-Crown 8-Ether

MHCC-97H人細(xì)胞(高轉(zhuǎn)移) MHCC-97H human hepatoma cells (high ansfer) DMEM+10%FBS二苯并-18-冠-6-醚(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)Dibenzo-18-crown 6-Ether

TNFSF8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (His 標(biāo)簽)13-乙基-18,19-二去甲基-17α-pregn-4-en-20-yn-17-ol(左炔諾孕酮雜質(zhì)D)質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口13-Ethyl-18,19-dinor-17α-pregn-4-en-20-yn-17-ol(Levonorgestrel Impurity D)

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。