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冷凍保存細(xì)胞之方法？
人腎成纖維細(xì)胞提取物 Human Renal : Normal Renal Fibroblast Derivatives冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)人腎成纖維細(xì)胞提取物 Human Renal : Normal Renal Fibroblast Derivatives說(shuō)明書！

人腎成纖維細(xì)胞提取物 Human Renal : Normal Renal Fibroblast Derivatives

     人腎成纖維細(xì)胞提取物是從人腎成纖維細(xì)胞提取的，人腎成纖維細(xì)胞從正常人腎組織制備。正常人腎組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
人腎成纖維細(xì)胞提取物 Human Renal : Normal Renal Fibroblast Derivatives對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

MDBK細(xì)胞，牛腎細(xì)胞 人轉(zhuǎn)基因細(xì)胞,RKO-AS45-1細(xì)胞 CM-H109人破骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL頭孢克洛Cefaclor質(zhì)量規(guī)格：>98%,一水合,BR

大鼠肝細(xì)胞;BRL頭孢拉定Cefradine質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

IL6ST Others Human 人 IL6ST / gp130 / CD130 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 頭孢拉定(標(biāo)準(zhǔn)品)Cefradine質(zhì)量規(guī)格：>95%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞MEF頭孢唑肟,頭孢唑肟酸Ceftizoxime acid質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

CDH8 Others Rat 大鼠 Cadherin-8 / CDH8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 頭孢唑肟(標(biāo)準(zhǔn)品)Ceftizoxime acid質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞RNAHPASMC miRNA5 μg達(dá)沙替尼（無(wú)水）（標(biāo)準(zhǔn)品）Dasatinib質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

MTDH Others Human 人 MTDH / lyric / metadherin 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 阿齊沙坦Azilsartan質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

豬細(xì)胞;ST阿齊沙坦(標(biāo)準(zhǔn)品)Azilsartan質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

U251細(xì)胞，細(xì)胞 鼠成纖維細(xì)胞系,NIH/3T3細(xì)胞 人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7伊維菌素(標(biāo)準(zhǔn)品)Ivermectin質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

KM小鼠未分化神經(jīng)瘤株;B22SB431542,SB-431542SB-431542質(zhì)量規(guī)格：>98%TGF-β抑制劑

人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(HOPC)(貼壁生長(zhǎng)) 人間充質(zhì)干細(xì)胞-肝 AGS人胃腺癌細(xì)胞十二烷基三甲基氯化胺[離子對(duì)色譜級(jí)]質(zhì)量規(guī)格：離子對(duì)色譜用試劑IPC-DTMA-Cl

CM-H113人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL乙酸二丁基銨(約0.5mol/L的水溶液)[離子對(duì)色譜級(jí)]質(zhì)量規(guī)格：用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑IPC-DBAA (ca.  0.5mol/L in Water)

TNFRSF11B Others Cynomolgus 食蟹猴 Osteoprotegerin / TNFRSF11B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 二甲基亞砜(農(nóng)殘級(jí))質(zhì)量規(guī)格：農(nóng)殘級(jí)Dimethyl sulfoxide

人腎小管上皮細(xì)胞HRPTEpiC十二烷基三甲基氯化銨（DTAC）(99%,離子對(duì)色譜級(jí))質(zhì)量規(guī)格：99%,離子對(duì)色譜級(jí)Dodecyltrimethylammonium chloride

VLcop細(xì)胞，人細(xì)胞 小鼠系,LA795細(xì)胞 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞MLF二十酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC))質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC)Methyl Arachidate

人腎成纖維細(xì)胞提取物 Human Renal : Normal Renal Fibroblast DerivativestTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-1D3 膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL3'-對(duì)羥基紫杉醇質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口3'-p-Hydroxy Paclitaxel

SK-MEL-1, 人皮膚細(xì)胞 Human紫杉醇-d5質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Paclitaxel-d5

BCHE Others Human 人 BCHE / CHE1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 7-差向紫杉酚質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口7-epi-Taxol

人小氣道上皮細(xì)胞RNAHSAEpiC miRNA5 μg紫杉醇C質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Paclitaxel C

SEMA5A Others Human 人 SEMA5A / Semaphorin-5A / SEMAF 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-6α-羥基-7-差向-紫衫醇質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-6α-hydroxy-7-epi-paclitaxel

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。