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冷凍保存細(xì)胞之方法？
大鼠腦內(nèi)皮細(xì)胞 RatBrain:NormalCerebralVenousVascularEndothelialCells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)大鼠腦內(nèi)皮細(xì)胞 RatBrain:NormalCerebralVenousVascularEndothelialCells說明書！

大鼠腦內(nèi)皮細(xì)胞 RatBrain:NormalCerebralVenousVascularEndothelialCells

     產(chǎn)品描述：大鼠腦內(nèi)皮細(xì)胞的主要功能是維持內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡，合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)參與免疫反應(yīng)，維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡。公司提供的大鼠腦內(nèi)皮細(xì)胞，采用采用膠原酶消化制備而來。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品大鼠腦內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(RatBrainPrimaCell：NormalCerebralVenousVascularEndothelialCellsCatNo.3-7491)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，大鼠腦內(nèi)皮細(xì)胞傳5代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
大鼠腦內(nèi)皮細(xì)胞 RatBrain:NormalCerebralVenousVascularEndothelialCells對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

HMGB1 Others Human 人 HMGB1 / HMG1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 血紅素(>95%,BR)Hematin質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

敘利亞倉鼠皮膚細(xì)胞;GH-S1聚乙二醇800PEG 800質(zhì)量規(guī)格：BR

OPTN Others Human 人 Optineurin / OPTN 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 炔雌醚;炔雌醇環(huán)戊醚Quinestrol質(zhì)量規(guī)格：USP

卵巢微內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)磷酸二酯酶 (比活度：>20 U/mg，BC)Phosphodiesterase I from Crotalus adamanteus Venom質(zhì)量規(guī)格：比活度：>20 U/mg，BC

人臍平滑肌細(xì)胞 人胚肺細(xì)胞，NCI-H1563[H1563]細(xì)胞 MLTC-1(間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞)碘化丙啶(>95% (HPLC),BC)Propidium iodide質(zhì)量規(guī)格：>95% (HPLC),BC

CM-R024大鼠淋巴成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL蝙蝠葛諾林堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Daurinoline質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1 小鼠小腸內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氯化木蘭花堿Magnoflorine chloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CSC, 小鼠心肌細(xì)胞 Mouse木蘭花堿Magnoflorine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

SPARC Others Mouse 小鼠 SPARC / BM-40 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 碘化木蘭花堿Magnoflorine iodide質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

人橫紋肌細(xì)胞;A-204去甲烏藥堿鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)Higenamine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

FAM3B Others Human 人 FAM3B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 透明質(zhì)酸鈉；玻璃酸鈉質(zhì)量規(guī)格：>95%,蛋白≤0.1%Sodium hyaluronate

小鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氫化可的松質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Hydrocortisone

YAC-1小鼠細(xì)胞 YAC-1 mouse lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS格列吡嗪 （標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Glipizide

IL17RD Protein Canine 重組狗 IL17RD 蛋白 (His 標(biāo)簽)鹽酸多奈哌齊I型質(zhì)量規(guī)格：含量98.0-102%,I型Donepezil HCl

人脈絡(luò)絲表皮細(xì)胞 (HCPEpiC)( 5×105 ) 人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞 Saos-2，人成細(xì)胞雌酚酮/雌酮質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP32Estrone

大鼠腦內(nèi)皮細(xì)胞 RatBrain:NormalCerebralVenousVascularEndothelialCellsPromocell C-22120 Endothelial Cell GrowthMedium MV KIT, 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基MV套裝 500ml辛伐他汀羥基酸銨鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Simvastatin Hydroxy Acid, Ammonium Salt

人真皮成纖維細(xì)胞-總RNAHDF-a NAN-氧基索拉菲尼質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Sorafenib N-Oxide

小鼠小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞(MA-c)(5×105)甲基索拉菲尼-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Sorafenib-methyl-d3

中國倉鼠肺細(xì)胞;CHL硫康唑質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Sulconazole

小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));LA1-VAP33-GFP 小鼠虹膜色素上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL6-羥基質(zhì)量規(guī)格：>98%(GC);進(jìn)分6-Hydroxycoumarin

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。