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冷凍保存細胞之方法？
大鼠大隱內(nèi)皮細胞 RatVascular:NormalSaphenousVeinEndothelialCells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細胞都是現(xiàn)貨供應，詳細大鼠大隱內(nèi)皮細胞 RatVascular:NormalSaphenousVeinEndothelialCells說明書！

大鼠大隱內(nèi)皮細胞 RatVascular:NormalSaphenousVeinEndothelialCells

     產(chǎn)品描述：大鼠大隱內(nèi)皮細胞分離自正常大鼠大隱內(nèi)皮，呈單層扁平分布。內(nèi)皮細胞或內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細胞，由一層扁平細胞所組成。它形成的內(nèi)壁，是管腔內(nèi)血液及其他壁（單層）的接口。內(nèi)皮細胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng)，由直至最少的微。公司提供的大鼠大隱內(nèi)皮細胞，均來自新鮮組織。細胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品大鼠大隱內(nèi)皮細胞培養(yǎng)試劑盒(RatVascularPrimaCell:NormalSaphenousVeinEndothelialCellsCatNo.3-7190)來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞（如脂肪細胞、纖維細胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下，大鼠大隱內(nèi)皮細胞可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度?？萍继峁┑募毎袠藴实蔫b定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務標準。
      保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
大鼠大隱內(nèi)皮細胞 RatVascular:NormalSaphenousVeinEndothelialCells對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細胞凍存】
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

HFL-I細胞，人胚 鼠肌原細胞,C2C12細胞 T-105BIII型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL鹽酸氟西?。藴势罚?/span>Fluoxetine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

SK-N-SH(人神經(jīng)母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2馬來酸氟伏沙明Fluvoxamine maleate質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BP2007

HUVEC-c Growth Medium 2single donor 500,000cells Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)馬來酸氟伏沙明（標準品）Fluvoxamine maleate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

原代細胞特制基礎無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml福美斯坦Formestane質(zhì)量規(guī)格：>99%

MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP8 / CLG1 CHO細胞裂解液 (陽性對照) 福美斯坦(標準品)Formestane質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%,標準品

人角膜上皮細胞裂解物HCEpiCL促腎上腺皮質(zhì)激素（1-10），人ACTH (1-10), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

CCL6 Others Mouse 小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 人細胞裂解液 (陽性對照) 促腎上腺皮質(zhì)激素（1-13），人ACTH (1-13), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

BEAS-2B 人上皮細胞促腎上腺皮質(zhì)激素（1-16），人ACTH (1-16), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

CL-0166NCI-H1650(人非小細胞細胞)5×106cells/瓶×2促腎上腺皮質(zhì)激素（1-17），人ACTH (1-17), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

MM, 小鼠小膠質(zhì)細胞促腎上腺皮質(zhì)激素(1-24), 人ACTH (1-24), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

DMBT1 Others Human 人 DMBT1 / GP340 人細胞裂解液 (陽性對照) 米格列醇質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRMiglitol

CM-R093大鼠胎兒真皮成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL米格列醇(標準品)質(zhì)量規(guī)格：GC>98%,標準品Miglitol

PLA2G2D Others Human 人 PLA2G2D / Phospholipase A2 IID 人細胞裂解液 (陽性對照) 氟化鎳四水(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRNickel (II) fluoride tetrahydrate

小鼠間充質(zhì)干細胞-骨髓MMSC-bm二氧化硅(>99.9%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>99.9%,BRSilicon (IV) oxide

Sol8細胞，小鼠骨骼肌肌肉母細胞 人腎上皮細胞,GES細胞 人骨骼肌成肌細胞HSkMM氟化鍶(>97%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRStrontium fluoride

大鼠大隱內(nèi)皮細胞 RatVascular:NormalSaphenousVeinEndothelialCellsQSG-7701細胞，人胚肝細胞正常 人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株,7WPS1細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆); EPO-CHO-T7-酮基去氫表雄酮質(zhì)量規(guī)格：>98%7-Keto-dehydroepiandrosterone

LLC-MK2(恒河猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2硝酸銣質(zhì)量規(guī)格：>99%Rubidium nitrate

Promocell Drosophila Schneider's Drosophila Medium果蠅培養(yǎng)基，無L-谷氨酰胺 500mlCHIR-99021 (CT99021.HCl)質(zhì)量規(guī)格：>99%,GSK-3α/β抑制劑CHIR-99021 (CT99021) HCl

人主動脈平滑肌細胞總RNAHASMC NA駱駝蓬堿;駱駝蓬靈;哈梅靈(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Harmaline;Dihydroharmine

CFD Others Mouse 小鼠 CFD / Adipsin 人細胞裂解液 (陽性對照) JNJ-26854165 (Serdemetan)質(zhì)量規(guī)格：>98%JNJ 26854165

【復蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶，對細胞造成損害。復旦細胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價格，本公司出售的所有細胞僅供科研使用。