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冷凍保存細胞之方法？
小鼠腦內皮細胞 MouseBrain:NormalCerebralVenousVascularEndothelialCells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細胞都是現(xiàn)貨供應，詳細小鼠腦內皮細胞 MouseBrain:NormalCerebralVenousVascularEndothelialCells說明書！

小鼠腦內皮細胞 MouseBrain:NormalCerebralVenousVascularEndothelialCells

     產(chǎn)品描述：小鼠腦內皮細胞的主要功能是維持內外的動態(tài)平衡，合成和分泌細胞因子和介質參與免疫反應，維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡。公司提供的小鼠腦內皮細胞，采用采用膠原酶消化制備而來。細胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品小鼠腦內皮細胞培養(yǎng)試劑盒(MouseBrainPrimaCell：NormalCerebralVenousVascularEndothelialCellsCatNo.3-4491)來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞（如脂肪細胞、纖維細胞等）的污染，同時保證質量的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下，小鼠腦內皮細胞傳5代仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度?？萍继峁┑募毎袠藴实蔫b定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務標準。
      保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
小鼠腦內皮細胞 MouseBrain:NormalCerebralVenousVascularEndothelialCells對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細胞凍存】
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

人間充質干細胞-臍帶 Human鹽酸文拉法辛（標準品）Venlafaxine hydrochloride質量規(guī)格：>98%,標準品

TPST1 Others Human 人 TPST1 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸文拉法辛Venlafaxine hydrochloride質量規(guī)格：>98%,BR

雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3原卟啉IXProtoporphyrin IX質量規(guī)格：>95%

BST2 Others Human 人 TETHERIN / BST2 / CD317 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲磺酸羅哌卡因（標準品）Ropivacaine mesylate質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

原代上皮細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml甲磺酸羅哌卡因Ropivacaine mesylate質量規(guī)格：>98%,BR

SELE Others Rat 大鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人細胞裂解液 (陽性對照) 蛋白酶K(進分)Proteinase K質量規(guī)格：≥30units/mg protein,sigma分裝

CM-H025人*上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL蛋白酶K(Sigma)Proteinase K質量規(guī)格：≥30units/mg protein,sigma原裝

HuTu-80細胞，人十二指腸腺癌細胞 人細胞,HME2細胞 人肝永生化細胞;THLE-3胰凝乳蛋白酶抑制劑Chymostatin質量規(guī)格：進分

H9c2(2-1) (大鼠心肌細胞) 5×106cells/瓶×2亮抑蛋白酶肽(進口)Leupeptin 質量規(guī)格：≥95%,進口半硫酸鹽

CD80 Others Human 人 B7-1 / CD80 人細胞裂解液 (陽性對照) 胃酶抑素A;抑肽素;胃蛋白酶抑制劑Pepstatin A microbial質量規(guī)格：≥90%,進分

EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9803氫氧化鋁(>98%,BR)質量規(guī)格：>98%,BRAluminum hydroxide

CD59 Others Rat 大鼠 CD59 / CD59A / MAC / IP 人細胞裂解液 (陽性對照) 磷酸銨三水(>98%,BR)質量規(guī)格：>98%,BRAmmonium phosphate, tribasic , trihydrate

人子宮內膜上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL雷帕霉素/西羅莫司（標準品）質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Rapamycin(Sirolimus)

FO細胞，小鼠細胞 3T6-Swiss albino(胚胎成纖維細胞) 人臍內皮細胞(人細胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]甲磺酸雷沙吉蘭質量規(guī)格：>98.5%Rasagiline Mesylate

CXCL9 Protein Mouse 重組小鼠 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白白藜蘆醇質量規(guī)格：>97.0%,BRResveratrol

小鼠腦內皮細胞 MouseBrain:NormalCerebralVenousVascularEndothelialCellsNRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標簽)Bz-rA亞磷酰胺單體質量規(guī)格：>98%,BRBz-rA Phosphoramidite

MA-891(小鼠癌高轉移細胞) 5×106cells/瓶×2 腦成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)i-bu-rG亞磷酰胺單體質量規(guī)格：>98%,BRi-bu-rG Phosphoramidite

神經(jīng)星形膠質細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)PF299804（EGFR抑制劑）質量規(guī)格：>99%,可用于細胞培養(yǎng)Dacomitinib

ANGPTL4 Others Human 人 ANGPTL4 人細胞裂解液 (陽性對照) Ac-rC亞磷酰胺單體質量規(guī)格：>98%,BRAc-rC Phosphoramidite

大鼠腎足突細胞完全培養(yǎng)基 100mLRp-腺苷 3′,5′-環(huán)單硫代磷酸酯鈉鹽質量規(guī)格：美國進口Rp-Adenosine 3′,5′-cyclic Monophosphorothioate, Sodium Salt

【復蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶，對細胞造成損害。復旦細胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價格，本公司出售的所有細胞僅供科研使用。