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冷凍保存細(xì)胞之方法？
成年小鼠心肌細(xì)胞 MouseCardiac:NormalMyocardialCells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)成年小鼠心肌細(xì)胞 MouseCardiac:NormalMyocardialCells說明書！

成年小鼠心肌細(xì)胞 MouseCardiac:NormalMyocardialCells

     產(chǎn)品描述：心肌細(xì)胞構(gòu)成心壁的主要成分。為博動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。心肌細(xì)胞根據(jù)其生理功能可分為兩類,即工作性心肌細(xì)胞和傳導(dǎo)性心肌細(xì)胞。其中工作性心肌細(xì)胞構(gòu)成心房肌和心室肌,是心壁的主要組成部分,具有興奮、傳導(dǎo)和收縮的功能;而自律性心肌細(xì)胞組成的傳導(dǎo)系統(tǒng),包括竇房結(jié)、結(jié)間束、房室交界、左右束支和普肯耶纖維網(wǎng)。它們除有興奮、傳導(dǎo)的功能外,還有自律性,即不受神經(jīng)支配與體液的影響,有產(chǎn)生周期性興奮的能力。竇房結(jié)興奮,將沖動(dòng)擴(kuò)布到心肌,引起心肌的收縮,從而產(chǎn)生心肌細(xì)胞的生物電現(xiàn)象。所以心肌細(xì)胞具有興奮性、自律性、傳導(dǎo)性和收縮性四種生理特性。公司提供的小鼠心肌細(xì)胞（乳鼠），采用膠原酶消化制備而來。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品成年小鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(MouseCardiacPrimaCell:NormalMyocardialCellsCatNo.3-4247)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，成年小鼠心肌細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
成年小鼠心肌細(xì)胞 MouseCardiac:NormalMyocardialCells對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

HFDPC-c 人類的毛細(xì)胞(HFDPC) 500,000cells 膀胱平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)銥標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基質(zhì)：2.0mol/L鹽酸)Iridium standard solution質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基質(zhì)：2.0mol/L鹽酸

平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)鎳標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑：1%硝酸)Nickel standard質(zhì)量規(guī)格：500mg/L,溶劑：1%硝酸

IFNA8 Others Human 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL,基體:1%HCl)Potassium standard質(zhì)量規(guī)格：100μg/mL,基體:1%HCl

中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA鐠標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL,基體：10%HCl)Praseodymium standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mL,基體：10%HCl

中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞-二氫葉酸還原酶缺陷型;CHO/dhFr- 喉表皮樣癌細(xì)胞，HEp-2細(xì)胞 SF-9細(xì)胞，昆蟲細(xì)胞系鎢標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體：0.1mol/LNaOH)Tungsten solution質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基體：0.1mol/LNaOH

MS751 人子宮頸表皮癌細(xì)胞度洛西汀Duloxetine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

NCI-H661人大細(xì)胞細(xì)胞 NCI-H661 large cell lung cancer cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS4-羥基度洛西汀4-Hydroxy Duloxetine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

AIMP1 Protein Human 重組人 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 (His 標(biāo)簽)5-羥基-6-甲氧基度洛西汀鹽酸鹽5-Hydroxy-6-methoxy Duloxetine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS 人成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLN-甲基度洛西汀N-Methyl Duloxetine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞總RNAHCPEpiC NA4-羥基度洛西汀β-D-葡萄糖苷酸4-Hydroxy Duloxetine β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

BST2 Others Human 人 TETHERIN / BST2 / CD317 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸萬古霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Vancomycin HCl

C57BL/6小鼠胚胎干細(xì)胞 C57BL/6 mouse embryonic stem cells凡德他尼質(zhì)量規(guī)格：>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Vandetanib

Hp2/o細(xì)胞，人跟細(xì)胞 赭曲霉 人胚;HFL-I海帶多糖；昆布糖 (來自褐藻類)質(zhì)量規(guī)格：BR，日本進(jìn)口分裝Laminarin from Laminaria digitata

SW 1990(人*癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2胰酶(1:250)，胰酶粉質(zhì)量規(guī)格：酶活1:250,BRPancreatin

HGC-27(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) 人臍內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C木瓜蛋白酶(800u/mg)質(zhì)量規(guī)格：800u/mgPapain

成年小鼠心肌細(xì)胞 MouseCardiac:NormalMyocardialCellsCLEC4M Others Human 人 CD299 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 安息香異丁基醚(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)Benzoin Isobutyl Ether

食管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)2,2-二乙氧基苯乙酮(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)2,2-Diethoxyacetophenone

KLRF1 Others Cynomolgus 食蟹猴 NKp80 / KLRF1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2,2-二甲氧基-2-苯基苯乙酮(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)2,2-Dimethoxy-2-phenylacetophenone

tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-3C82,4-二乙基硫雜蒽-9-酮(>90.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(GC)2,4-Diethylthioxanthen-9-one

HLAmP細(xì)胞，人肺巨細(xì)胞癌細(xì)胞 大鼠巨噬細(xì)胞,MC細(xì)胞 CL-0058CCRF-CEM(人急性淋巴細(xì)胞)5×106cells/瓶×2安乃近(標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Analgin

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。